ミトコンドリア病におけるDNA診断と病態の解明

线粒体疾病的DNA诊断和病理阐明

• 批准号: 04260227
• 负责人: 宝来 聰
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04260227/
• 关键词: ミトコンドリア脳筋症; 慢性外眼筋麻痺症候群; ミトコンドリアDNA; 塩基配列; DNA診断; ヘテロプラスミィー

ミトコンドリア脳筋症に関しては、1990年以来、MELASにおけるtRNA^<Leu(UUR)>種類の点突然変異(塩基番号3243及び3271)、MERRFにおけるtRNA^<Lys>(塩基番号8344)の変異が、相次いで我々の研究グループにより報告された。しかし、これらの変異の同定されないミトコンドリア脳筋症や、大きな欠失の観察されない慢性外眼筋麻痺症候群(CPEO)はミトコンドリアDNA上の変異と疾患との関連は未だ不明である。我々はこれらの疾患においてミトコンドリアDNAの全tRNA領域の塩基配列を決定する研究を継続してきた。その結果、複合体I欠損を呈するミトコンドリア脳筋症患者に、上記のいずれでもない新たな点突然変異を発見した。この変異(塩基番号3250)はtRNA^<Leu(UUR)>のDHUループ上にあり、転写終結因子の結合ドメインの中にある。簡便なDNA診断を行なうため、この変異があれば制限酵素(Nael)の認識部位を新たに生じる様なPCRプライマーを作成し家系調査を行ったところ、複数のメンバーにこの変異が観察され、いずれも正常型DNAが混在するヘテロプラスミーであった。欠失をもたないCPO9例の解析では、6例の患者で各々1箇所あるいは2箇所に、計6箇所のtRNA遺伝子下塩基置換[tRNA^<Glm>(塩基連号4343及び4386)、tRNA^<Ala>(5601)、tRNA^<Arg>(10410)、tRNA^<Leu(CUN)>(12311)、tRNA^<Thr>(15927)]を認めたが、患者間に共通した変異はなかった。さらに制限酵素を用いたDNA診断により、tRNA^<Leu(CUN)>(12311)変異以外はいずれもホモプラスミーであること、正常人にも存在する変異であることが明らかとなり、これらの塩基置換が疾患異的な変異でなく多型であると結論した。しかし、tRNA^<Leu(CUN)>(12311)変異は90名の正常対照には見いだされず、今後多くの症例による検討が必要である。

Milton muscle syndrome, since 1990, there has been a sudden change in the type of MELAS RNA^<Leu(UUR)> (Japanese code number 324 3 and 3271), MERRF tRNA^<Lys>(塩集团号8344)の変isoが, Aisiji いで我々のResearch Report された.しかし、これらの変differentの同定されないいミトコンドリア脳 Muscle disease や、大きな owed loss の観看されないchronic external Ophthalmoplegia Syndrome (CPEO) is a disease that is different in DNA and has no unknown relationship. I am doing research on the disease and diseases in the whole tRNA field of DNA and the research on it. As a result, the patient with complex I deficiency showed a sudden change in the point of sudden change in the patient with tendon syndrome. The tRNA^<Leu(UUR)>のDHU ループ上にあり, the binding terminator of 転WRITE の中にある. Simple DNA diagnosis is made by using the recognized parts of the restricted enzyme (Nael) and the new PCR-based PCRしgenealogy surveyれ、いずれもNormal DNA is mixed with するヘテロプラスミーであった. Analysis of 9 cases of CPO due to loss, 6 cases of patients, 1 case each, 2 cases, 6 cases calculated NA substituent substitution [tRNA^<Glm> (base serial numbers 4343 and び4386), tRNA^<A la>(5601), tRNA^<Arg>(10410), tRNA^<Leu(CUN)>(12311), tRNA^<Thr>(15927)]をcognitionめたが, common and different between patients.さらにRestriction enzyme を Use いたDNA diagnosis により, tRNA^<Leu(CUN)>(12311) 変different はいずれもホモプラスミーであること、Normal people exist する変different であることが明らかとなり、これらの塩婩综合が Diseases are different and な変different でなく polytype であると Conclusion した.しかし, tRNA^<Leu(CUN)>(12311) 変different 90 people's normal treatment is as follows, and there are many cases of disease in the future.

项目成果

Hasegawa M.: "Time of the deepest rrot for polymorphisms in juman mitochondrial DNA." J.Mol.Evol.32. 37-42 (1991)

长谷川 M.：“人线粒体 DNA 多态性最严重恶化的时间。”

Horai S.: "Japanese as a Memder of the Asian and Pacific Populations K.Hanihara.(ed)." Internatinal Research Center for Japanese Studies, 251 (1992)

Horai S.：“日本人作为亚洲和太平洋地区人口的组成部分 K.Hanihara。（编）。”

Horai S.: "Peopling of the Americas,founded by four major limrages of nitochondrial DNA." Mol.Biol.Evol.10(1). 23-47 (1993)

Horai S.：“美洲人民，由四种主要的线粒体 DNA 组成。”

Horai S.: "New era of bioenergetics Y.Mukohata.(ed)." Academic Press,Trkyo, 308 (1991)

Horai S.：“生物能量学的新时代 Y.Mukohata.（编）。”

Goto Y.: "A new mtDNA mutation associated with mitochondrial myopathy,encepharlothy,lactic acidosis and stroke-like episodes(MELAS)" Biocjimica Biophysica Acta. 1097. 238-240 (1991)

Goto Y.：“一种与线粒体肌病、脑病、乳酸性酸中毒和中风样发作 (MELAS) 相关的新 mtDNA 突变”Biocjimica 生物物理学学报。