アスコルビン酸ペルオキシダーゼの分子的性質の解明
抗坏血酸过氧化物酶分子特性的阐明
基本信息
- 批准号:05209213
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1993
- 资助国家:日本
- 起止时间:1993 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
アスコルビン酸ペルオキシダーゼ(APX)は植物および真核藻類に特異的に存在し、過酸化水素やそれから生じるヒドロキシラジカルによる障害から葉緑体やその他の細胞内成分を防御する。この酵素がなければ光合成にとって最適な条件下でも不可避的に生成する過酸化水素によって炭酸固定系は数秒のうちに失活する。今年度はストロマ型イソ酵素のクローニングを行いその分子的性質の解明を試みた。キュウリ子葉cDNAライブラリーをチャストロマ型アスコルビン酸ペルオキシダーゼ(APX)抗体を用いてスクリーニングし、得られたクローンの塩基配列を決定したところ、750bpのORFを見いだした。一次配列からこのORFは細胞質型APXであると予想された。また、他のペルオキシダーゼとの相同性を調べたところ、グアヤコールペルオキシダーゼよりも酵母チトクロムcペルオキシダーゼ(CPX)との相同性が高く、CPXにおいて反応機構に直接関与すると考えられているTrp、Arg、Asp残基はいずれもAPX上に保存されていた。ペルオキシダーゼは過酸化水素との反応でラジカル中間体を形成するが、このときグアヤコールペルオキシダーゼではポルフィルンラジカルが、CPXではTrpがラジカルとなることが知られており、APXがCPXタイプの反応中間体を形成することが示唆された。細胞質型イソ酵素との相同性を調べたところ、約55%と低く、またN末端の配列が全く異なっていることから、葉緑体型と細胞質型イソ酵素はそれぞれ独立に進化してきたと考えられる。
APX is a defense against plant and eukaryotic algae specific presence, hyperacidification, and other intracellular components. Under the optimum conditions, the enzyme can not avoid the formation of hyperacidified water and the inactivation of carbon acid immobilized system for a few seconds. This year, we try to understand the properties of the molecules involved in the development of enzymes. The 750bp ORF was determined by the sequence analysis of the cDNA fragments. The primary alignment of the ORF is cytoplasmic. The identity of CPX is high, and the identity of CPX is directly related to Trp, Arg, and Asp residues. CPX is the most important component in the preparation of the intermediate. Cytoplasmic type enzymes have the same identity, about 55%, and the N-terminal alignment is completely different. Chloroplast type and cytoplasmic type enzymes have evolved independently.
项目成果
期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
K.Amako: "Separate assays of ascorbate peroxidase and guaiacol peroxidase and of chloroplastic and cytosoic isozymes of ascorbate peroxidases in plants." Plant & Cell Physiology. 35. (1994)
K.Amako:“植物中抗坏血酸过氧化物酶和愈创木酚过氧化物酶以及抗坏血酸过氧化物酶的叶绿体和细胞质同工酶的单独测定。”
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- 影响因子:0
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- 通讯作者:
C.Miyake: "Purification and molecular properties of thylakoid-bound ascorbate peroxidase from spinach chloroplasts." Plant & Cell Physiology. 34. 881-889 (1993)
C.Miyake:“菠菜叶绿体中类囊体结合的抗坏血酸过氧化物酶的纯化和分子特性。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
C.Miyake: "Ferrodoxin-dependent photo reduction of monodehydroascorbate radicals in spinach thylakoids." Plant & Cell Physiology. 35. (1994)
C.Miyake:“菠菜类囊体中单脱氢抗坏血酸自由基的铁氧还蛋白依赖性光还原。”
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
S.Sano: "cDNA cloning of monodehydroascorbate radical reductase from cucumber" Plant & Cell Physiology. 35. (1994)
S.Sano:“来自黄瓜的单脱氢抗坏血酸自由基还原酶的 cDNA 克隆” 植物
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- 发表时间:
1994 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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