自食作用に関与する遺伝子群の分子生物学的解析

自噬相关基因的分子生物学分析

• 批准号: 05252209
• 负责人: 大隅 良典
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05252209/
• 关键词: 自食作用; APG変異; タンパクキナーゼ; 酵母; 栄養飢餓

近年我々は酵母細胞が種々の栄養飢餓条件下に高等動物細胞で知られると同様な自食作用を誘導することを見いだした。すなわち細胞を種々の栄養飢餓にさらすと1時間後に液胞内に細胞質を内容物とする-重膜構造-自食体が形成される。この形態学的な特徴に基づき自食作用に欠損をもつ変異株を系統的に取得した。それらの遺伝解析の結果、この過程に少なくとも15個のAPG遺伝子が関与することを明らかにした。これは複雑で高度に制御されている自食作用の研究に初めて遺伝学的手法を導入したものである。これらAPG遺伝子の構造と機能の解析を通じて自食作用の膜動態を分子レベルで理解することを目的とした。最初に得られたAPGI遺伝子のクローニング、塩基配列の決定、遺伝子破壊、遺伝子の改変、遺伝子産物の同定を行った。その結果APGI遺伝子は897個のアミノ酸からなるタンパク質キナーゼをコードすることが明らかとなった。現在自食作用の誘導に必須の本酵素の詳細な解析を進めている。さらに他の多数のAPG変異もクローニング、構造解析が進行中であり、これらの相互関係の解析が進みつつある。pg変異は電子顕微鏡観察の結果、極立った膜構造の蓄積をもつものはみとめられなかった。しかし液胞欠損株二重変異株はオートファゴソームを蓄積することが明らかとなり今後の生化学的解析の手掛りが得られた。

In recent years I 々 は が kind of yeast cells 々 の tech students.their ownship keep hunger で に higher animal cells under the condition of known ら れ る と with others な eat role を induced す る こ と を see い だ し た. す な わ ち cells を kind 々 の tech students.their ownship keep hunger に さ ら す と に liquid after 1 time intracellular に cytoplasm を contents と す る が - heavy membrane structure - from the body formation さ れ る. The な characteristics of the <s:1> morphology に basis づ <s:1> autophagic action に underdamage を に variation of the を system obtained た. そ れ ら の heritage 伝 analytical の results, こ の process less に な く と も 15 の traces of APG 伝 son が masato and す る こ と を Ming ら か に し た. こ れ は complex 雑 で highly に suppression さ れ て い る eat early の study に め て but 伝 learn technique を import し た も の で あ る. こ れ ら traces of APG 伝 の tectonic analytical を と function の son tong じ て dynamic を の membrane molecules from food レ ベ ル understand で す る こ と を purpose と し た. Originally に ら れ た APGI posthumous son 伝 の ク ロ ー ニ ン グ, salt base with column の decided, but 伝 壊, heritage 伝 son の change - set を on the same line, but the latter's 伝 の っ た. Son そ の results APGI heritage 伝 は 897 の ア ミ ノ acid か ら な る タ ン パ ク qualitative キ ナ ー ゼ を コ ー ド す る こ と が Ming ら か と な っ た. Now, the <s:1> induction of autotrophic action に must be analyzed in detail な of this enzyme を in めて る る. さ ら に he の most の APG - different も ク ロ ー ニ ン グ, structure during parsing が で あ り, こ れ ら の mutual masato is の parsing が into み つ つ あ る. Pg - different は electronic 顕 micromirror 観 の results, a vertical っ た membrane structure の accumulation を も つ も の は み と め ら れ な か っ た. し か し vacuole owe damage seedlings は double - different オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム を accumulation す る こ と が Ming ら か と な り future の biochemical analytical の hands hang り が must ら れ た.

项目成果

Baba,M.,Takeshige,K.Baba,N.,& Ohsumi,Y.: "Ultrastructural analysis of the autophagic process in yeast:Autophagosomes and their characterization." J.Cell Biol.120(in press). (1994)

Baba，M.，Takeshige，K.Baba，N.，

Ohsumi,M.,Uchiyama,K.,Ohsumi,Y.: "Density fluctuation during the cell cycle of the fefective vacuolar morphology mutants." J.Bacteriol.175. 5714-5716 (1993)

Ohsumi,M.、Uchiyama,K.、Ohsumi,Y.：“有性液泡形态突变体细胞周期中的密度波动。”

大隅良典、馬場美鈴、大隅萬理子: "酵母における自食作用の発見" 蛋白質核酸酵素. 38. (1993)

Yoshinori Osumi、Misuzu Baba、Mariko Osumi：“酵母自噬的发现”蛋白质核酸酶 38。（1993）

大隅良典: "液胞におけるタンパク質分解" 植物細胞工学. 16. 19-27 (1994)

大隅良典：“液泡中的蛋白水解”植物细胞工程 16. 19-27 (1994)。

Tsukada,M.,& Ohsumi,Y.: "Isolation and characterization of autophagy-deficient mutants in Saccharomyces cerevisiae." FEBS Lett.333. 169-174 (1993)

冢田，M.，