液胞内タンパク分解の定量化とその生理的役割の解析

液泡内蛋白水解的定量及其生理作用分析

• 批准号: 05640725
• 负责人: 大隅 良典
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05640725/
• 关键词: 自食作用; 液胞; タンパク質分解; apg変異; H^+-ATPase; 酵母

細胞活動は絶えず合成と分解が動的な平衡関係によって維持されている。タンパク質の細胞内分解経路としてはユビキチン経路とリソソーム(液胞)経路とが知られている。最近我々は酵母の液胞に於ける分解が高等動物の自食作用と同様な機構によることを明らかにして来た。本研究は液胞内での分解-自食作用がいかなる機構によって誘導されるか、また液胞内の分解はいかなる生理的役割を担っているかについて、タンパク質分解を定量化することを通じて明らかにすることを目的とした。本年度の研究によって得られた主な成果は以下の通りである。(1)自食作用不能株(apg1-15)、タンパク分解酵素欠損株、液胞欠損株などを用いて、放射性アミノ酸標識細胞のタンパク分解における自食作用の寄与を明らかにした。(2)PMSFを用いることにより野生型酵母の液胞内タンパク質分解を定量化し、栄養飢餓下に誘導されるタンパク質分解が細胞の生存率の維持に必須の役割をもつことを示した。(3)自食体の液胞内分解に欠損をもつ変異株を系統的に分離し、4つの変異abd1-4を同定した。abd1,2,3はそれぞれ液胞膜H^+-ATPaseの構成サブユニットをコードするVAM遺伝子の変異であった。自食体の分解にはH^+-ATPaseが必須である。

The な balance relationship of えず synthesis と decomposition が movement in cellular activities によって maintains されて る る る. タ ン パ ク qualitative の cell decomposition 経 road と し て は ユ ビ キ チ ン 経 road と リ ソ ソ ー ム (vacuole) 経 road と が know ら れ て い る. I recently 々 は yeast の vacuole に in け る decomposition が の higher animals eat role と with others な institutions に よ る こ と を Ming ら か に し て た. This study は liquid intracellular で の decomposition - eat が い か な る institutions に よ っ て induced さ れ る か, ま た liquid decomposition of intracellular の は い か な る physical battle cut を bear っ て い る か に つ い て, タ ン パ ク qualitative decomposition を quantitative す る こ と を tong じ て Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. The main な achievements of the によって research in this year are as follows: によって である. (1) from the function can't plant (apg1-15), タ ン パ ク decomposition enzyme owe loss, vacuole owe damage of な ど を with い て, radioactive ア ミ ノ acid logo cell の タ ン パ ク decomposition に お け る eat the role の Ming ら を か に し た. (2) PMSF を with い る こ と に よ り wild type yeast の liquid intracellular タ ン パ decomposition を ク qualitative quantitative し, tech students.their ownship に starvation induced さ れ る タ ン パ ク qualitative decomposition の が cell survival の maintain に must cut を の service も つ こ と を shown し た. (3) The <s:1> intracellular decomposition of the autophagic fluid in the に underdamaged を を を <s:1> mutant strains を system に separation <s:1>, 4 <s:1> mutant abd1-4を determination <s:1> た た. Abd1, 2, 3 は そ れ ぞ れ vacuole membrane H ^ + - ATPase の constitute サ ブ ユ ニ ッ ト を コ ー ド す る VAM heritage 伝 son の - different で あ っ た. The autophagic body <s:1> decomposes に に H^+-ATPaseが must である.

项目成果

Baba,M.,Takeshige,K.Baba,N.,& Ohsumi,Y.: "Ultrastructural analysis of the autophagic process in yeast:Autophagosomes and their characterization." J.Cell Biol.120(in press). (1994)

Baba，M.，Takeshige，K.Baba，N.，

Ohsumi,M.,Uchiyama,K.,Ohsumi,Y.: "Density fluctuation during the cell cycle of the fefective vacuolar morphology mutants." J.Bacteriol.175. 5714-5716 (1993)

Ohsumi,M.、Uchiyama,K.、Ohsumi,Y.：“有性液泡形态突变体细胞周期中的密度波动。”

大隅良典、馬場美鈴、大隅萬理子: "酵母における自食作用の発見" 蛋白質核酸酵素. 38. (1993)

Yoshinori Osumi、Misuzu Baba、Mariko Osumi：“酵母自噬的发现”蛋白质核酸酶 38。（1993）

大隅良典: "液胞におけるタンパク質分解" 植物細胞工学. 16. 19-27 (1994)

大隅良典：“液泡中的蛋白水解”植物细胞工程 16. 19-27 (1994)。

Tsukada,M.,& Ohsumi,Y.: "Isolation and characterization of autophagy-deficient mutants in Saccharomyces cerevisiae." FEBS Lett.333. 169-174 (1993)

冢田，M.，