酵母の自食作用に必須な遺伝子の分子生物学的解析

酵母自噬必需基因的分子生物学分析

• 批准号: 08278207
• 负责人: 大隅 良典
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08278207/
• 关键词: 自食作用; 酵母; 栄養飢餓; 液胞; リソソーム; APG

自食作用は、真核細胞に普遍的で重要な生理機能である。我々が見いだした酵母の自食作用をモデル系として、分子遺伝子学的手法により自食作用に関わる分子の同定と機能の解析を進めている。本年度に得られた主な成果は以下の通りである。これまで得られている14個の自食作用不能変異(apg)を相補することを指標にAPG遺伝子群のクローニングと構造解析を進め、本年度までに13個の遺伝子の同定に成功した。これらは全て新規の遺伝子であった。我々が開発したアルカリ性ホスファターゼを用いた自食作用の検出系を用いて、APG遺伝子間の相互作用を解析した結果、Apglタンパクキナーゼの過剰発現によってspg13が抑圧されること、APG7の過剰発現によってapg4が抑圧されることが見いだされた。APG13は、親水性のタンパク質をコードしており、興味深いことにApg13pは増殖期にはリン酸化されており、栄養飢餓下には脱リン酸化される。栄養条件で存在様式が速やかに変動するタンパク質としてはじめて同定されたタンパク質である。APG9は、構造から膜タンパク質であることが推定され、細胞分画法などによりこのことが確認された。自食作用におけるダイナミックな膜動態を解析する上で重要な指標タンパク質となることが期待される。APG7は飢餓条件に応答してその発現が著しく上昇する。現在までにApg1,4,6,7,8,9,13に対する特異抗体を作製し、遺伝子産物の同定と細胞内局在性の解析を進めている。栄養培地中でも、自食作用が誘導されるcsc1,csc2の解析を進め、2つの遺伝子を同定した。

The physiological mechanism of autophagy and eukaryotes is very important. We have studied yeast autophagy, molecular biology, molecular homeostasis, molecular homology and molecular analysis. The following "general information" has been awarded this year. A total of 14 cannibalists were successfully identified (apg). The APG subgroups were analyzed successfully, and the 13 cannibales were successfully tested this year. All new rules and regulations are in full swing. We use self-feeding to analyze the results of the analysis of the interaction between APG users, the results of the analysis of the interaction between spg13 devices, and the results of the analysis of the interaction between users in the system by using the self-feeding system, the results of the analysis, the results of APG13, Apg13p, Apg13p, acid, acid and acid. There is a formula in the condition that there is no change in terms and conditions, and there is no problem. The APG9, the membrane, the membrane, the presumption, the cell division method, the cell division method, the cell division method and the cell division method. Self-feeding is important in the analysis of membrane dynamics. APG7, please answer the question. Now you are going to have a problem. Now that the specific antibody is used as an Apg1,4,6,7,8,9,13 antibody, and the product is the same as that, the cell is in the process of sexual analysis. In the process of csc1,csc2 analysis, self-feeding and self-feeding were used to determine the same level of growth.

项目成果

Nakamura,N.et al: "Acidification of vacuoles is required for autophagic degradation in the yeast,Saccharomyces cerevisiae." J. Biochem.193 (in press). (1997)

Nakamura,N.等人：“酿酒酵母中的自噬降解需要液泡的酸化。”

Shirahama,K.et al,: "Vacuolar function in the phosphate homeostasis of the yeast Saccharomyces cerevisiae." Plant Cell Physiol.37. 1090-1093 (1996)

Shirahama,K.等人：“酿酒酵母磷酸盐稳态中的液泡功能。”

Funakoshi,T.et al: "Analyses of APG13 gene involved in the autophagy in yeast,Saccharomyces cerevisiae." Gene. 179 (in press). (1997)

Funakoshi,T.et al：“酿酒酵母中参与自噬的 APG13 基因分析。”

Scott,S.V.et al: "Cytoplasm-to-vacuole targeting and autophagy employ the same machinery to deliver proteins to the yeast vacuole." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 93. 12304-12308 (1996)

Scott,S.V.等人：“细胞质到液泡的靶向和自噬采用相同的机制将蛋白质递送到酵母液泡。”

Kametaka,S.et al: "Structual and functional analyses of APG5,a gene involved in autophagy in yeast." Gene. 178. 139-143 (1996)

Kametaka,S.et al：“APG5（一种参与酵母自噬的基因）的结构和功能分析。”