各種ストレスに対する生体の細胞内サイトカインを介した自己防御機構の解析

生物体细胞内细胞因子介导的针对各种应激的自卫机制分析

• 批准号: 05268232
• 负责人: 渡辺 直樹
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05268232/
• 关键词: Heat Shock Protein(HSP); Tumr Necrosis Factor(TNF); Endogenous TNF; Heat Shock Factor(HSE); Heat Shock Element(HSE)

これまで我々は、細胞内に存在するTNFがantioxidant enzyme(MnSOD)の誘導を介し、熱ショック、ある種の抗癌剤(Doxorubicin)や外から加えられたTNF自身(外因性TNF)などの細胞ストレスに対し、防御因子として働いていることを見い出してきた。しかし、細胞内TNFと熱ショック蛋白質(HSPs)など他のストレス応答系との相互関係は、いまだ不明であった。そこで本研究では、細胞内TNFがHSPsの発現に及ぼす影響およびその分子機構について検討した。HSP72産生の誘導に与える細胞内TNFの影響を、35S-メチオニンでパルスラベルした非分泌型TNF発現ベクター(pTNFDELTApro)およびantisense TNF mRNA(PLJ-anti TNF)導入細胞のcell lysateを、抗HSP72抗体で免疫沈降後、SDS-PAGE、autroradeiographyし解析したところ、L-M(pTNFDELTApro)細胞のHSP72発現量は、37℃ではL-M細胞と差はなかったが、加温(42℃,1時間)後には、L-M細胞の約3倍に増加した。一方、HeLa細胞では、antisense TNF mRNAの導入により、加温時におけるHSP72の発現が抑制された。さらに、熱ショック時における各細胞のcytosolに存在するHSF(heat shock factor,HSPsの転写因子)の、HSE(heat shock element,HSPsのプロモーター領域の共通配列)に対する結合性を、32Pでラベルした合成HSEを用いたゲルシフト解析で検討したところ、L-M(pTNFDELTApro)細胞では親細胞に比べ著明に上昇していた。一方、HeLa細胞ではantisense TNF mRNA導入により、HSFのHSE結合性は明らかに低下していた。すなわち、細胞内TNFは、熱ショック時においてHSFのHSEに対する結合性を高めることにより、HSP72の発現を増強することが示唆された。

There are TNF antioxidant enzyme (MnSOD), anti-cancer (Doxorubicin), anti-cancer, anti-cancer, anti TNF, intracellular protein (HSPs), protein, protein. The results of this study, the detection of intracellular TNF HSPs and the molecular mechanism of this study. The expression of intracellular TNF was detected in the presence of nonsecretory TNF (pTNFDELTApro). Antisense TNF mRNA (PLJ-anti TNF) was introduced into the cell after immunoprecipitation of anti-HSP72 antibody, SDS-PAGE, autroradeiography, LFCM M (pTNFDELTApro), HSP72, 37 ℃, 37 ℃, respectively. Heating (42 ℃) (1 time) after that, the cell size of Lmuri M cell is about 3 times higher than that of the control group. One side, HeLa cell temperature, antisense TNF mRNA cell temperature, heating time to check the HSP72 temperature to inhibit the temperature. There is a HSF (heat shock factor,HSPs writing factor), HSE (a common configuration in the field of heat shock element,HSPs communication) in each cell of the computer, and the combination of HSE and 32p in the synthesis of HSE is better than that of the HSE (pTNFDELTApro). On the one hand, HeLa cells showed that the antisense TNF mRNA was involved, and the combination of HSF and HSE showed that the disease was low. The combination of cold, intracellular TNF, HSF, HSE, and HSP72 indicates that they are strong and instigated.

项目成果

Watanabe N.,et al.: "Cancer Treatment by Hyperthermia,Radiation and Drugs." Taylor and Francis, 10 (1993)

Watanabe N. 等人：“通过热疗、放射线和药物进行癌症治疗”。

Umeno H.,et al.: "Enhancement of blood stasis and vacular permeability by administration of hyperthermia in combination with tumor necrosis factor." Jpn.J.Cancer res.(in press).

Umeno H.等人：“通过热疗与肿瘤坏死因子的结合来增强血瘀和血管通透性。”

Maeda M,et al.: "Endogenous tumor necrosis factor as a resistant factor against adriamycin." Int.J.Cancer. (in press).

Maeda M,et al.：“内源性肿瘤坏死因子作为阿霉素耐药因子。”

Maeda M,et al.: "Lysosome labilizers potentiate the anti tumor effects of tumor necrosis factor-alpha." Jpn.J.Cancer Res.84. 451-454 (1993)

Maeda M 等人：“溶酶体稳定剂可增强肿瘤坏死因子-α 的抗肿瘤作用。”

Maeda M.,et al.: "Enhanced antitumor effect of recombinant human tumor necrosis factor in combination with recombinant human granulocyte colony-stimulating factor in BALB/c mice." Jpn.J.Cancer Res.84. 921-927 (1993)

Maeda M.,et al.：“重组人肿瘤坏死因子与重组人粒细胞集落刺激因子联合使用，可增强 BALB/c 小鼠的抗肿瘤作用。”