HPV16E2蛋白の子宮頸癌細胞増殖阻害の分子機構の解明とその応用に向けての研究

HPV16E2蛋白抑制宫颈癌细胞生长的分子机制阐明及应用研究

• 批准号: 09253223
• 负责人: 酒井 博幸
• 金额: $ 2.94万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09253223/
• 关键词: HPV; 子宮頚癌; E2; 転写因子

1.細胞増殖阻害に必要なE2の機能解析E2の発現ベクターをHPV陽性の子宮頚癌細胞に導入してその細胞増殖に及ほす影響を調べたところ、E2のDNA結合性、転写活性化機構の両方が細胞増殖阻害に対して重要であることが分かった。また転写活性の強弱と増殖阻害活性の程度の間にも相関が認められた。2.細胞増殖阻害におけるE2の作用機序HPVによる子宮頸癌発症にはウイルス性の因子としてE6とE7の働きが重要であると考えられるが、E2はそれらの発現を転写レベルで抑制することが知られている。この転写抑制活性にもDNA結合能と転写活性化機構の両方が必要であることが明らかとなった。Hela細胞でも実際にE2発現によって組み込まれたHPVゲノムからのE6/E7転写が抑制されることが確認できた。E6/E7の発現制御、特にE6の発現抑制の結果予測されるp53タンパクの安定化、p21発現の増加、cdk活性の抑制、pRBの低リン酸化状態へのシフトが確認された。3.E2による細胞増殖への効果の特異性E2による細胞増殖への影響が特異的なものかを、HPV陽性と陰性の子宮頸癌由来細胞を用いて解析した。その結果E2の効果はHPV陽性細胞でのみ観察され、その特異性が示された。またE2のN末側に含まれる転写活性化ドメインをVP16やp300のものと交換したキメラ型タンパクで、この作用のE2特異性を調べた。いずれのキメラタンパクも強い転写活性可能を保持していたが癌細胞の増殖は阻害できなかった。またこれらのキメラタンバタはE6/E7の転写も抑制できなかった。つまりE2特有の転写括性化機構が細胞増殖調節や転写抑制にも機能することを示している。4.DNA複製におけるE2の機能を検討したところE1-E2相互作用とE2のDNA結合性が重要であることが分かっていたが、今回の解析から転写かアクティブなDNA鋳型の複製に関してはE2の転写活性化機能も重要な役割を果たすことが示された。このことは転写因子であるE2がDNA複製にも関与する意義を示すものである。

1. Functional analysis of E2 necessary for inhibiting cell growth It affects the regulation of DNA binding, E2's DNA binding, and the activation mechanism of transcription. It also inhibits cell proliferation and is important. The strength of the activity and the degree of growth-inhibiting activity are related to each other. 2. Mechanism of action of cell proliferation inhibitor E2, HPV, cervical cancer, sexual factor, E6, E 7の働きがimportant であると考えられるが、E2はそれらの発appearsを転writesレベルで suppressesすることが知られている.この転WRITE inhibiting activity にもDNA binding energy と転WRITING activation mechanism の両方がESSENTIAL であることが明らかとなった. Hela cells have been tested for E2 suppression and suppression of HPV infection. E6/E7's appearance control, special prediction of the result of E6's appearance suppression, stabilization of p53's P53, The expression of p21 is increased, the cdk activity is suppressed, and the low acidification state of pRB is confirmed. 3. The specificity of the E2 cell proliferation effect. The specificity of the E2 cell proliferation effect and the analysis of HPV-positive and negative cervical cancer-derived cells. The result of E2 is that the effect of HPV-positive cells is detected and the specificity is shown.またE2のN terminal contains まれる転activated ドメインをVP16やp300 The のものと exchanges the したキメラ type タンパクで, the このeffect のE2 specific をadjusted べた. The strong writing activity of いずれのキメラタンパクも may prevent the proliferation of cancer cells and prevent it.またこれらのキメラタンバタはE6/E7の転WRITTEN できなかった. The E2-specific humanized mechanism regulates cell proliferation and inhibits the function of the cells. 4. The function of DNA replication is very important, and the E1-E2 interaction and DNA binding of E2 are important.が、This chapter's analysis and analysis is the key to the DNA replication and activation function of E2.このことは転Writing factor であるE2がDNA replication にも关 and するmeaning をshow すものである.

项目成果

Y.Iwatani 他: "Human immunodeficiency virus type 1 Vpu modifies viral cytopathic effect through augmented virus release" Journal of General Virology. 78. 841-846 (1997)

Y. Iwatani 等人：“人类免疫缺陷病毒 1 型 Vpu 通过增强病毒释放来改变病毒细胞病变效应”《普通病毒学杂志》78. 841-846 (1997)。

T.Yasugi 他: "Two classes of human papillomavirus type 16E1 mutants suggest pleiotropic conformational constraints affectinfE1 multimerization,E2 interaction,and interaction with cellular proteins." Journal of Virology. 71. 5942-5981 (1997)

T. Yasugi 等人：“两类人乳头瘤病毒 16E1 型突变体表明多效性构象限制会影响 E1 多聚化、E2 相互作用以及与细胞蛋白的相互作用。”Journal of Virology 71. 5942-5981 (1997)。

T.Yasugi 他: "Mapping and characterization of the interaction domains of human papillomavirus type 16 El and E2 proteins" Journal of Virology. 71. 891-899 (1997)

T. Yasugi 等人：“人乳头瘤病毒 16 型 E1 和 E2 蛋白相互作用域的映射和表征”病毒学杂志 71. 891-899 (1997)。