寄生各ステージにおけるマラリア原虫の蛋白質燐酸化、脱燐酸化酵素の解析と役割の検討

目的本研究の目的は、燐酸化酵素、脱燐酸化酵素の作用薬(阻害薬や活性化薬)を用いた薬理学的解析と、ゲル内燐酸化法などの生化学的解析を組み合わせ、マラリア原虫の燐酸化、脱燐酸化酵素の生理的機能を明らかにすることである。結果と考察1、Calphostin C,Staurosporine,KN62などのCa^<2+>-dependent protein kinaseの阻害剤がP.falciparumのin vitroの増殖を強く制御した。2、P.falciparumの約115-175kDaの5種のprotein kinase、約64kDaのprotein kinaseがtrophozoiteからschizontにかけて強く発現することが観察された。54kDのCa^<2+>-dependent protein kinaseはschizontからtrohozoite期にかけて強く発現する傾向があった。1、2の結果より、Ca^<2+>-dependent protein kinaseは、赤血球期原虫の分裂増殖の制御に関与していることが示唆された。3、Calyculin A、Okadaic acidなどprotein phosphatase 1、2Aの阻害剤がP.falciparumのin vitroの増殖を強く制御し、特にtrophozoiteに強い増殖抑制効果を示した。4、P.falciparumにserine/threonine phosphatase type 1およびtype2活性が存在することが、明らかにされ、protein phosphatase type1活性が優位であった。3、4の結果より、protein phosphatase type1は赤血球期原虫の増殖に必須で、trophozoite期で重要な役割を果していると考えられた。

目的本研究の目的は、燐酸化酵素、脱燐酸化酵素の作用薬(阻害薬や活性化薬)を用いた薬理学的解析と、ゲル内燐酸化法などの生化学的解析を組み合わせ、マラリア原虫の燐酸化、脱燐酸化酵素の生理的機能を明らかにすることである。結果と考察1、Calphostin C,Staurosporine,KN62などのCa^<2+>-dependent protein kinaseの阻害剤がP.falciparumのin vitroの増殖を強く制御した。2、P.falciparumの約115-175kDaの5種のprotein kinase、約64kDaのprotein kinaseがtrophozoiteからschizontにかけて強く発現することが観察された。54kDのCa^<2+>-dependent protein kinaseはschizontからtrohozoite期にかけて強く発現する傾向があった。1、2の結果より、Ca^<2+>-dependent protein kinaseは、赤血球期原虫の分裂増殖の制御に関与していることが示唆された。3、Calyculin A、Okadaic acidなどprotein phosphatase 1、2Aの阻害剤がP.falciparumのin vitroの増殖を強く制御し、特にtrophozoiteに強い増殖抑制効果を示した。4、P.falciparumにserine/threonine phosphatase type 1およびtype2活性が存在することが、明らかにされ、protein phosphatase type1活性が優位であった。3、4の結果より、protein phosphatase type1は赤血球期原虫の増殖に必須で、trophozoite期で重要な役割を果していると考えられた。