ビタミンDレセプターのリガンド依存的な転写活性化機構

维生素D受体配体依赖性转录激活机制

• 批准号: 09277213
• 负责人: 西川 淳一
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09277213/
• 关键词: 転写調節; ビタミンD; 転写共役因子; 核内レセプター

ビタミンDレセプター(VDR)は核内レセプターファミリーに属する転写調節因子であり、リガンドの存在の有無により転写のスイッチをオンにしたりオフにしたり出来ることから、真核生物の転写機構を研究するのに適している。核内レセプターを介する転写調節に関し、最近多くの転写共役因子がクローニングされているが、その詳細な分子機構は不明である。そこで、我々はVDRを用い、これら転写共役因子のリガンド依存的な転写活性化における役割について検討した。これまでにクローニングされている転写共役因子のうち、CBP、p300、RIP140、TIF1、SRC1、TIF2、ACTRについてVDRとの相互作用を調べたところ、CBP、p300、TIF1とVDRの相互作用は弱く、それ以外の因子は比較的強くリガンド依存的にVDRと相互作用した。しかし、培用細胞を用いた転写活性化の実験ではSRC1のみがVDRの転写活性化能を増強したが、他の因子には促進的な作用は認められなかった。また、p/CAFはSRC1の作用をさらに増強した。一方、RIP140には用量依存的にVDRの転写活性化を抑制する効果が見られた。VDRのC端に存在する疎水性アミノ酸に富む領域の変異体を作製し、その転写活性化能と転写共役因子との相互作用を調べたところ410番目のロイシンをアラニンに変換した変異体ではRIP140、TIF2、ACTRとの相互作用は減少したにもかかわらず、転写活性化能は保持していた。SRC1は中央付近とC端の2ヵ所にReceptor Interaction Domain(RID)を持つが、L410Aの変異体が結合出来たのはC端側のRIDのみであった。また、413番目のロイシンをアラニンに変換した変異体及び418番目のフェニルアラニンをアラニンに変換した変異体では、転写活性化能と転写共役因子との相互作用のいずれも消失していた。

The study of eukaryotic transcription mechanisms is based on the analysis of transcription regulation factors in nuclear transcription. The molecular structure of the nuclear molecule is unknown. In addition, we have to use VDR to write the common service factor, which depends on the activity of the active service. The interaction between CBP, p300, RIP140, TIF1, TIF2, ACTR and VDR is weak, and the interaction between factors other than VDR is strong. The activation of SRC1 and VDR in cultured cells is enhanced by the action of other factors. The role of p/CAF in SRC1 has increased. On the one hand, RIP140 is a dose-dependent inhibitor of VDR activation. The interaction between RIP140, TIF2, and ACTR is reduced due to the presence of a variable number of active molecules in the C-terminal region of VDR, and the presence of a variable number of active molecules in the C-terminal region. SRC1 is close to the center of the terminal and 2 are connected to the Receptor Interaction Domain(RID). L410A is connected to the terminal and RID is connected to the terminal. In addition, the interaction between the active energy and the common service factor has been eliminated.