内分泌攪乱物質のオーファンレセプターを介する作用発現機構

孤儿受体介导的内分泌干扰物的作用机制

• 批准号: 14042233
• 负责人: 西川 淳一
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14042233/
• 关键词: 内分泌攪乱物質; 環境ホルモン; 核内レセプター; 生殖毒性; オーファンレセプター

生物の発生・分化や生殖、恒常性の維持に重要な役割を果たしている核内受容体は低分子で脂溶性の高い生理活性物質であるステロイドホルモンや甲状腺ホルモンの受容体である。一方で、生態系に悪影響を与えてきた農薬やPCB等の化学物質の多くは、生体に取り込まれやすく、蓄積性の高い低分子の脂溶性物質である。これらのことは、環境汚染物質による内分泌撹乱作用が、核内受容体を介していることを示唆している。しかし、環境汚染物質の種類は非常に多く、また核内受容体もヒトにおいて48種類存在し、莫大な数の化学物質の多種類の受容体への影響を調べるためには、簡便で経済性に優れたハイスループット型のアッセイ系が必要である。本課題では、これらのことに対応するため新規核内受容体リガンドスクリーニンク系の構築を進めてきた。アッセイ系は、核内受容体による転写活性化が受容体とコアクチベーターのリガンド依存的な相互作用に始まることを利用し、マイクロウエルプレート上に固定化した受容体に、化学物質とともにコアクチベーターとアルカリフォスファターゼの融合タンパク質を加え、洗浄後プレート上に残ったアルカリフォスファターゼ活性を検出することにより、核内受容体への化学物質の結合性を判定できる系を構築した。このアッセイ系を用い、内分泌撹乱物質と疑われている化学物質について、複数の受容体への影響を調べだ結果、ノニルフェノール等のアルキルフェノール類はエストロゲン受容体だけでなく、ビタミンA受容体にも影響を示すことが分かった。また、海産巻貝類にインポセックスを誘起する有機スズ化合物は、レチノイドX受容体に強い活性を示した。これらのことは、内分泌撹乱物質は性ホルモン受容体だけを標的とするのではなく、複数の核内受容体に影響を与え、これらの複合した作用が生体に毒性を与えることを示唆している。

Biological の 発 や reproductive, differentiation, constancy の maintain に important な "を cut fruit た し て い る nuclear within the capacity of body は low molecular で fat-soluble の high い physiological active substances で あ る ス テ ロ イ ド ホ ル モ ン や thyroid ホ ル モ ン の by let body で あ る. Party で, ecosystem に 悪 influence を and え て き た farmers 薬 や PCB の の chemicals such as much く は, from birth body に り 込 ま れ や す く, chemicals の high い low molecular の fat-soluble substances で あ る. こ れ ら の こ と は, environmental pollutants に よ endocrine 撹 disorderly る が を interface, within the nuclear capacity body し て い る こ と を in stopping し て い る. し か し, kinds of environmental pollutants の は very に く, ま た nuclear within the capacity of body も ヒ ト に お い て 48 species exist し chemicals, great な の の variety の by let body へ の influence を adjustable べ る た め に は, simple で 経 済 sex に optimal れ た ハ イ ス ル ー プ ッ ト type の ア ッ セ イ department が necessary で あ る. This topic で は, こ れ ら の こ と に 応 seaborne す る た め new rules within the nucleus by the capacity of body リ ガ ン ド ス ク リ ー ニ ン ク is の build を into め て き た. ア ッ セ イ は, nuclear within the capacity of body に よ る planning write activeness が by let body と コ ア ク チ ベ ー タ ー の リ ガ ン ド dependent な of interacting に beginning ま る こ と を using し, マ イ ク ロ ウ エ ル プ レ ー ト に immobilized on し た let body に, chemical と と も に コ ア ク チ ベ ー タ ー と ア ル カ リ フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ の fusion タ ン パ ク quality を plus え Incorporated, after プ レ ー ト に on residual っ た ア ル カ リ フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ active を 検 out す る こ と に よ り, within the nuclear capacity body へ の chemicals の associativity を determine で き る department を build し た. こ の ア ッ セ イ department を material with い, endocrine 撹 と suspected わ れ て い る chemicals に つ い て, plural の let body へ の influence を adjustable べ だ results, ノ ニ ル フ ェ ノ ー ル etc. の ア ル キ ル フ ェ ノ ー ル class は エ ス ト ロ ゲ ン by let body だ け で な く, ビ タ ミ ン by a. let body に も influence を shown す こ と が points か っ た. ま た, seafood 巻 shellfish に イ ン ポ セ ッ ク ス を induced す る organic ス は ズ compounds, レ チ ノ イ ド X を and shown by the strong capacity of body に い activity し た. こ れ ら の こ と は, endocrine 撹 disorderly substances は ホ ル モ ン by let body だ け を mark と す る の で は な く, plural の nuclear affected by the capacity of body に を and え こ れ ら の composite し た role が body を に toxicity and え る こ と を in stopping し て い る.

项目成果

Shiraishi, F. et al.: "Estrogenic and thyroid hormone activity of a series of hydroxy-polychlorinated biphenyls"Ghemosphere. Vol.52. 33-42 (2003)

Shiraishi, F. 等人：“一系列羟基多氯联苯的雌激素和甲状腺激素活性”Ghemosphere。

Mikamo, E. et al.: "Methoxychlor induces CYP2C11 to convert itself into hormonally active metabolites"Journal of Health Science. Vol.49. 229-232 (2003)

Mikamo, E. 等人：“甲氧滴滴涕诱导 CYP2C11 将自身转化为激素活性代谢物”健康科学杂志。

Kanayama, T. et al.: "Basis of a high-throughput method for nuclear receptor ligands"Journal of Biochemistry. Vol.133. 791-797 (2003)

Kanayama, T. 等人：“核受体配体高通量方法的基础”生物化学杂志。

Kawamura, Y. et al.: "Estrogenic activities of UV stabilizers used in food contact plastics and benzophenone derivatives tested by the Yeast two-hybrid assay"Journal of Health Science. Vol.49. 205-212 (2003)

Kawamura, Y. 等人：“通过酵母双杂交测定测试食品接触塑料中使用的紫外线稳定剂和二苯甲酮衍生物的雌激素活性”健康科学杂志。

Mikamo, E. et al.: "Endocrine disrupters induce cytochrome P450 by affecting transcriptional regulation via pregnane X receptor"Toxicology and Applied Pharmacology. Vol.193. 66-72 (2003)

Mikamo, E. 等人：“内分泌干扰物通过孕烷 X 受体影响转录调节来诱导细胞色素 P450”毒理学和应用药理学。