シロイヌナズナにおけるキネシン様モーター蛋白質遺伝子の構造と発現制御機構

拟南芥驱动蛋白样运动蛋白基因的结构及表达调控机制

基本信息

  • 批准号:
    09279207
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.6万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1997 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

高等植物シロイヌナズナからは、既にキネシン様モーター蛋白質であるKatA〜KatCが同定され,いずれも細胞分裂の進行に深く関与することが示唆されている。今回、シロイヌナズナの花器を材料にして作製したcDNAライブラリーから、キネシン重鎖モータードメインに対応する遺伝子プローブを用いて新たにkatDを単離した。katDは全長2964bpのORFからなり、コードされる蛋白質の分子サイズは約110kDと推定された。ゲノムDNAの塩基配列との比較により、katDのゲノムDNA中には18個のイントロンが介在することが示された。KatD蛋白質の中央部にはモータードメインと高い相同性を示す領域が存在したが、他のKat蛋白質群のそれとは系統分類学的な距離が認められた。このモータードメインを含む領域を大腸菌内で過剰発現させた蛋白質はAMP-PNPに依存した微小管への結合能を示した。予測されるKatDの二次構造には二量体の形成に必要なa-ヘリックスコイル構造が認められないことから、単量体で機能することが予想された。モータードメインからC末端にかけては、他のKat蛋白質にはみられない機能未知の約230アミノ酸からなる領域が存在した。KatD抗体を用いたイムノブロット解析により、KatD蛋白質の花器特異的な蓄積が認められた。また、RNAブロット解析により、この器官特異性は転写レベルで制御されていることが示された。以上より、KatDは他のKat蛋白質とは構造的および機能的に大きく異なり、花器で特異的に発現する初めてのキネシン様蛋白質であることが明らかとなった。
In higher plants, there is no difference between the protein and the KatA~KatC, and the deep division of the cells in the higher plants indicates the instigation of the disease. This time, you can use the new katD to separate the material from the flower. This time, you can use the new katD. The full-length 2964bp, ORF, and protein molecules of katD were presumed to be highly sensitive to 110kD. The DNA base is assigned to compare the DNA, and the 18 customer accounts in the katD database are displayed in the database. The high homogeneity of KatD proteins in the central region indicates that there is a gap in the field and that there is a distance between Kat protein groups and systematic classification. The results show that the protein AMP-PNP is dependent on microtubule binding. It is necessary to create a two-dimensional body for the second time of the KatD system, which is necessary. The reason why there is a significant difference between the C-terminal and the Kat protein level is that there is a significant difference between the two groups. KatD antibody was used to analyze the expression of KatD protein in floral organ. In order to analyze the characteristics of organs, to analyze the characteristics of organs and to display the characteristics of organs. The above, KatD and other Kat protein products are used to improve the performance of the machine, and the floral apparatus is specially designed to show that the protein content is very high.

项目成果

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知道了