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ウニ精子鞭毛運動におけるダイニン分子の挙動とその制御機構の解明

阐明动力蛋白分子在海胆精子鞭毛运动中的行为及其控制机制

基本信息

批准号：
09279215
负责人：
真行寺千佳子
金额：
$ 1.47万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09279215/
关键词：
鞭毛運動ダイニン滑り運動力発生 1分子計測振動ウニ精子

项目摘要

細胞運動の多くは,モーター蛋白質が起こす滑り運動を原動力とする.滑り運動は,化学エネルギーを機械的エネルギーに変換することにより起こるが,このときモーター蛋白質がどのように力を発生し,力発生がどのように制御される結果,細胞の運動につながるかについては明らかにされていない.本研究では,ウニ精子鞭毛におけるダイニンに着目し,その分子レベルの機能を,新しい生理学的アプローチを用いて,制御機構との関連のもとに解明することを目指した.滑りの制御機構はinvitro系では普通失われてしまう.本研究の代表者は,最近,エラスターゼを用いることにより,ある程度制御機構を保持したままで滑り運動を起こさせる系を開発した.そこで,この系を応用することにより,上記目的を達成することを目指した.鞭毛膜を抽出後断片化した軸糸をcagedATPとともにチェンバーに入れ,エラスターゼ処理後顕微鏡下で,UV-flashによりcagedATPを光分解して滑りを起こさせダブレット微小管1本になるようにした.このダブレットに重合微小管にビーズをつけたもの作用させ,再び光分解によりATPを放出させてダイニンによる力の発生を光ピンセット法を用いて測定した.その結果,微小管をダブレットに対して45-90度で作用させると力測定が可能であることが明らかとなり,ダイニン1個の腕あたり約6pNの力発生があることが解った.この力発生に伴い,微小管が約100m変位し,それは数ms-数s維持された.このことは,ダイニン腕がprocessivemotorであることを示唆している.さらに,力と変位の振動が起こることを見つけた.振動は0.75mM ATP付近では約72HzでATP濃度の低下とともに減少した.この振動がダイニン1個の腕により起こっているとするとそれは大変興味深い.1個の腕(2つの頭部)によりどのように振動が起こるのかは不明であるが,この振動が鞭毛運動の基礎的現象であると推測される.

The cell moves more frequently, and the protein starts to slide the original kinetic force. The mechanical equipment of the chemical equipment is operated by the machine, the machine is operated by the chemical machine, the machine is operated by the machine, the machine is operated by the machine, the machine is operated, and the machine is used. In this study, spermatozoa flagellum scrofula were detected, molecular markers were used, new physiological tests were used, and the control machine was used to understand the target of the sperm flagellum. The control machine of the sliding machine is in the system of invitro. it is common to lose the equipment. The representative of this study, recently, the system has been used to control the level of operation, and the degree of control has been maintained by the government. Please write down the name of the item in the book. After the flagellum is extracted, the flagellum is fragmented. After extraction, the flagellum is fragmented. After the cagedATP is removed, the flagellum is dissected. After the flagellum is removed, the flagellum is extracted, and the flagellum is extracted. After the flagellum is extracted, the flagellum is segmented. After the flagellum is extracted, the flagellum is divided into fragments, UV-flash, cagedATP, photolysis, microtubule, and microtubule. The microtubule is coincident with the microtubule, and the photolysis is used to determine the effect of the microtubule, and then the photolysis is used to determine the effect of the microtubule. The photolysis method is used to determine the temperature. The results showed that the microtubule temperature was 45-90 degrees Celsius, and the effect of the microtubule was 45-90 degrees Celsius. The results showed that the microtubule was sensitive to the stress test, and the results showed that the microtubule was sensitive to 45-90 degrees. The results showed that the results showed that the microtubule temperature was 45-90 degrees Celsius. The results of the results showed that the microtubule temperature was 45-90 degrees Celsius. The results of the results showed that the microtubule temperature was 45-90 degrees Celsius. The microtubule is about 100m, and the number of microtubules is ms- number s to maintain the temperature. I'm sorry, I'm sorry, I'm processivemotor, I'm sorry, I'm sorry. When you are in a position of strength, you are going to have to do something about it. The vibration 0.75mM ATP is close to the 72Hz. The ATP is very low. One wrist was used to start an unidentified one, and the flagellum was moved to the base to push the baby.