Identifizierung und Struktur/Funktionsanalyse der Protein-Nitrierung in eosinophilen Granulozyten und in chronisch entzündetem murinem und humanem Lungengewebe durch hochauflösende Proteomanalyse

通过高分辨率蛋白质组分析对嗜酸性粒细胞以及慢性炎症小鼠和人肺组织中的蛋白质硝化进行鉴定和结构/功能分析

基本信息

项目摘要

Oxidativ nitrierte Tyrosinreste in Proteinen werden als biochemische Marker chronischer Lungenentzündungen angesehen. Nitrotyrosin-Modifizierungen wurden bisher vor allem mit Antikörpern gegen 3-Nitrotyrosin (3-Nitrotyrosin) immunhistologisch im Lungengewebe von Patienten mit Asthma bronchiale und Mukoviszidose (synonym: cystische Fibröse, CF) nachgewiesen. Eine Charakterisierung der 3-Nitrotyrosin-positiven Proteine steht bisher ebenso aus wie eine mechanistische Erklärung ihrer Bildung. Wir konnten vor kurzem erstmals 3-NT-modifizierte Proteine in murinen und humanen eosinophilen Granulocyten mittels hochauflösender Massenspektrometrie identifizieren. Im vorliegenden Vorhaben sollen 3-NT-positive Proteine aus Bronchiallavagen chronisch entzündlicher Patienten isoliert, mittels 2D-Elektrophorese aufgetrennt und mittels hochauflösender massenspektrometrischer Proteomanalyse aufgeklärt werden, um somit einzelne spezifische NT-Modifizierungsstellen zu charakterisieren. Ferner soll untersucht werden, ob 3- NT-Modifikationen in Proteinen in vivo enzymatisch oder über die Bildung von Peroxynitrit entstehen. Als Schlüsselmethode zur Identifizierung von modifizierten Proteinen wird die hochauflösende Fouriertransform-Ionencyclotronresonanz-Massenspektrometrie (FTICR-MS) herangezogen. Durch die Identifizierung spezifischer oxidativen Protein-Modifizierungen soll das Vorhaben einen wesentlichen Beitrag für die Entwicklung molekularer Diagnostik-Methoden, Verlaufskontrolle und Therapie chronisch-entzündlicher Erkrankungen liefern.
蛋白质中的氧化硝基酪氨酸是ALS生化标记物的计时器。Nitrotyrosin-Modifizierungen Wurden Bisher vor allem MIT Antikörpern gegen 3-Nitrotyrosin(3-Nitrotyrosin)免疫组织学在Long gengewebe von Patienten MIT哮喘和Mukoviszidose(同义词:cystische firöse,CF)nachgewiesen。3-硝基酪氨酸阳性的蛋白质的特征是:Bisher ebenso Aus Wie eine Mechanical issche Erklärung irer Bildung.Wir konnten vor Kurzem erstmals 3-NT-Motifizierte Proteine in Murinen and Human en Eosinophilen Granululcien Mittels Hochauflösender Massenspecktrometrietren.我是Vorhaben Sollen 3-NT阳性的Proteine Aus Bronchialavagen chronisch enter Patienten Ioliert,Mittels 2D-Elektrophrese aufgetrennt and Mittels Hochauflösender Massentrotrometrischer Proteomanalyze aufgeklärt Werden,um Somit einzelne Spezifische NT-Modifizierungsstellen zu charakterisieren。我们在体内蛋白质酶中观察到了蛋白质的3-NT-修饰物。ALS Schlüsselmetode zur Identifizierung von Modifizierten Proteinen wird die Hochauflösende Fouriertransform-Ionencyclotronresonanz-Massenspektrometrie(FTICR-MS)herangezogen.在此过程中,我们发现了一种新型的氧化蛋白--Modifizierungen soll das Vorhaben einen Wesentlicen Beitrag für die Entwickular Molekuler Diagnostik-Methoden,Verlafskontrolle and Treatment ie Timisch-entzündlicher Erkrankungen liefern。

项目成果

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