ヒトリンホトキシンに対する細胞膜レセプタ-の構造

人淋巴毒素细胞膜受体的结构

基本信息

  • 批准号:
    01614511
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.92万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1989
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1989 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ヒトリンホトキシン(LT)レセプタ-をU937細胞粗膜画分より3つの方法により精製した。初めにLTを直線リガンドとするアフィニティクロマトグラフィ-を用いる方法、第2に抗LT抗体を用いたイムノアフィニティクロマトクラフィ-ではLT-LTレセプタ-複合体を精製する方法、第3に活性を保持したままLTをビオチン化しこれをアビジンアガロ-スに結合しアフィニティクロマトクラフィ-を用いる方法である。これらの結果、LTと特異的に結合する60Kと65Kの2つのチンパクが同定された。この2種類のタンパク質をSDS電気泳動後ゲルから抽出を行ない、それぞれ5μg程度精製を行なった。次にこの2つのタンパクが同一のものか否かを解討するためにペプチドマッピングを行なった。それぞれをエンドプロテイナ-ゼLys-Cにより37℃、一晩消化後C18を用いた逆相HPLCにかけた。これらのLys-C消化物のHPLC上での溶出パタ-ンは異なり、60Kと65Kのタンパクは異なるものであることが示唆された。また、これらのLys-Cフラグメントをそれぞれ分取しプロテインシ-クエンサ-にかけそれらのアミノ酸配列を調べたところ、いくつかのペプチドの部分アミノ酸配列が決定された。その結果、60Kと65Kのタンパクは明らかに異なるタンパクであることがわかった他に、コンピュ-タを用い他のタンパクとの相同性を調べたところ既知のタンパク質との相同性は認められなかった。60K、65Kの部分アミノ酸配列をもとにそれぞれ合成ペプチドを作成した。これらの合成ペプチドはBSAにカップリングしウサギあるいはマウスに免疫し60Kおよび65Kに対する抗体の作成を行なった。60KのタンパクはLTが結合することが明らかになっているが、65Kのタンパクの役割は一体何なのかこれらの抗体を用いて検討を行なっている。
The method of membrane separation of U937 cells is refined. The first method is to use LT as a straight line; the second method is to use anti-LT antibody; the third method is to use LT as a straight line; the fourth method is to use anti-LT antibody; the third method is to use anti-LT antibody; the fourth method is to use anti-LT antibody; the fourth method is to use anti-LT antibody; the third method is to use anti-LT antibody; the fourth method is to use anti-LT antibody; the fourth method is to use anti-LT antibody; the third method is to use anti-LT antibody; the fourth method is to use anti-LT antibody; the fourth method is to use anti-LT antibody; the third method is to use anti-LT antibody; the fourth method is to use anti-LT antibody; the fourth method is to use The result is that LT and specific binding are constant at 60K and 65K. The two kinds of SDS electrophoresis products were extracted and refined to 5μg. The second time, the two sides of the road were closed. All the above mentioned products were prepared by reverse phase HPLC at 37℃ and C18 after overnight digestion. The dissolution of Lys-C digest on HPLC is different, and the dissolution of Lys-C digest at 60K and 65K is different. In addition, the Lys-C phase of the reaction mixture is divided into three parts: the first part is selected from the group consisting of the first part and the second part is selected from the group consisting of the second part and the third part. The result is that 60K and 65K are different from each other, and the identity of each other is adjusted. 60K, 65K and 60 K The combination of these two components will result in the development of a 60K and 65K immune system. 60K and 65K are used for antibody detection.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
K.Hirano: "Characterization of specific high affinity receptor for human lymphotoxin" Journal of Biochemistry. 105. 120-126 (1989)
K.Hirano:“人类淋巴毒素特异性高亲和力受体的表征”生物化学杂志。
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    0
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ヒトリンホトキシンに対する細胞膜レセプターの構造
人淋巴毒素细胞膜受体的结构
  • 批准号:
    63614510
  • 财政年份:
    1988
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
マクロファージ活性化因子とその制癌への応用に関する実験的研究
巨噬细胞激活因子的实验研究及其在癌症防治中的应用
  • 批准号:
    62010015
  • 财政年份:
    1987
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Cancer Research
ヒトリンホトキシンに対する細胞膜レセプターの構造
人淋巴毒素细胞膜受体的结构
  • 批准号:
    62614511
  • 财政年份:
    1987
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
マクロファージ活性化因子とその制癌への応用に関する実験的研究
巨噬细胞激活因子的实验研究及其在癌症防治中的应用
  • 批准号:
    61010020
  • 财政年份:
    1986
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Cancer Research
マクロファージ活性化因子とその制癌への応用に関する実験的研究
巨噬细胞激活因子的实验研究及其在癌症防治中的应用
  • 批准号:
    60010020
  • 财政年份:
    1985
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Cancer Research
リンホカイン, モノカインの免疫生化学的研究
淋巴因子和单核因子的免疫生化研究
  • 批准号:
    59380016
  • 财政年份:
    1984
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Co-operative Research (A)
ヒトT細胞ハイブリドーマによるリンホカインズの生産と制癌への応用
人T细胞杂交瘤产生淋巴因子及其在癌症控制中的应用
  • 批准号:
    59015028
  • 财政年份:
    1984
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Cancer Research
非抗体血清成分による制癌
使用非抗体血清成分控制癌症
  • 批准号:
    58010021
  • 财政年份:
    1983
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Cancer Research
情報受容とその異常
信息接收及其异常
  • 批准号:
    58105004
  • 财政年份:
    1983
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Special Project Research
非抗体血清成分による制癌
使用非抗体血清成分控制癌症
  • 批准号:
    57010018
  • 财政年份:
    1982
  • 资助金额:
    $ 1.92万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Cancer Research
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