マクロファージ活性化因子とその制癌への応用に関する実験的研究

巨噬细胞激活因子的实验研究及其在癌症防治中的应用

• 批准号: 61010020
• 负责人: 大沢 利昭
• 金额: $ 9.86万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61010020/
• 关键词: マクロファージ活性化因子; ヒトT細胞ハイブリドーマ; ガンマインタフェロン; リポゾーム; 単クローン性抗体; 遺伝子クローニング

昨年度までの研究で、ヒトT細胞ハイブリドーマH3-E9-6が、ヒト単球の抗腫瘍活性化のためのプライミングシグナル(MAF-CI)と、トリガリングシグナル(MAF-C【II】を放出することを観察したが、本年度はこれらの部分精製を行ない、MAF-C【I】は分子量およそ30,000,MAF-C【II】はデオキシコール酸存在下分子量およそ40,000を示すたんぱく質であることを確かめた。H3-E9-6からのこれらの因子の完全精製と、遺伝子クローニングを現在実施中である。一方MAFを産生する他のヒトT細胞ハイブリドーマHM-89-11,HM-17-12よりはMAFのmRNAを精製し、Okayama-BergのCos7細胞発現ベクターを用いてCDNAライブラリーを作製した。さらにヒトマクロファージ様細胞株U937のPMA依存性【O(^-_2)】産生を増強する因子MAF-Oを放出するヒトT細胞ハイブリドーマF4-29-4を樹立し、このmRNAを抽出し、13,OS附近に沈降することを観察した。現在これについてもOkayama-Berg法を用いてCDNAライブラリーを作製中である。またこれらのMAFの臨床応用の基礎をかためるため、MAF-C【II】を、表面に抗A375細胞単クローン性抗体を結合させた免疫リポゾーム中に、マウスγインタフェロンと共に封入したのち、A375細胞を移植したヌードマウスに投与したところ、MAF-C【II】溶液投与の場合にくらべ、はるかに効果的にA375細胞の増殖を抑制することを見出した。さらにまたヒト単球活性化においてヒトγインタフェロンは、脂溶性ムラミルジペプチド誘導体封入リポゾームと相乗効果をもつこと、その相乗効果発現機序としてγインタフェロンによる単球のリポゾーム貪食亢進作用が第一段階として重要であることがわかった。これらの研究は、MAFやムラミルジペプチド誘導体をリポゾームに封入して投与することが投与剤型として極めて有効であることを示唆し、またγインタフェロンとの併用が効果的であることを示し、臨床応用へ向け前進できた。

Last year's research showed that MAF-CI, MAF-C [II], MAF-C [I] and MAF-C [II] were partially refined in this year's study. MAF-C [I] had a molecular weight of 30,000. MAF-C [II] had a molecular weight of 40 in the presence of hydrochloric acid. 000:00: H3-E9-6 MAF mRNA was purified from HM-89-11 and HM-17-12 cells and produced from Okayama-Berg Cos7 cells. PMA-dependent [O(^-_2)] production in cell line U937 was enhanced, factor MAF-O production was enhanced, expression of mRNA in T cells was enhanced, expression of mRNA in F4-29-4 was enhanced, and mRNA expression in the vicinity of OS was observed. The Okayama-Berg method is now used in the production of DNA. MAF [II] is the basis for clinical use, and MAF-C [II] is used to bind anti-A375 cell monoclonal antibodies to immune systems. MAF-C [II] is used to inhibit the proliferation of A375 cells. In addition, the activation mechanism of single sphere is the first stage of gluttony hyperactivity, which is important for lipid solubility. The study of MAF and its application in clinical medicine

项目成果

M.Higuchi: Microbiol.Immunol.(1987)

M.Higuchi：微生物学.免疫学.(1987)

S.Sone: Int.J.Cancer. 38. 495-500 (1986)

S.Sone：Int.J.Cancer。

K.Onozaki: Cancer Res.(1987)

小野崎：癌症研究（1987）

K.Inaba: J.Exp.Med.163. 1031-1035 (1986)

K.Inaba：J.Exp.Med.163。

S.Sone: Cancer immunol.Immunother.22. 191-196 (1986)

S.Sone：癌症免疫l.Immunother.22。