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ロイコトリエンの細胞間情報伝達における役割の解明

阐明白三烯在细胞间通讯中的作用

基本信息

批准号：
01641506
负责人：
清水孝雄
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01641506/
关键词：
ロイコトリエン受容体 GTP結合タンパク血小板活性化因子

项目摘要

細胞間情報伝達におけるアラキドン酸カスケ-ド、特にリポキシゲナ-ゼ系産物の役割を解明する目的で、本年度は(1)生合成酵素の細胞局在の解明、及び(2)ロイトコトリエン関連物質の細胞膜受容体の解析に関する研究を行った。ロイトコトリエンA_4水解酵素の細胞局在の解明同酵素cDNAを大腸菌内で発現させ、この蛋白で家兎を免疫し、得られた抗体をアフィニティカラムで精製した。この精製抗体はモルモットのいずれの組織でも分子量70K付近の単一蛋白を認識した。抗体を用い、種々の臓器を免疫染色したところ、小腸の粘膜上皮、気管や血管の平滑筋、さらに気管支上皮細胞に染色された。中枢神経では嗅脳や脊髄前角細胞等の神経細胞に腸性所見が得られた。これらの細胞でのロイコトリエンの役割の解明が重要となってきた。(2)ロイコトリエン受容体の解析三種類(C,D.B)のロイコトリエン結合能を全身臓器で調べると、Cは脳、下垂体、心臓に、Dは肺に、そしてBは脾、白血球等に多く存在する事が明らかとなった。それぞれの結合蛋白を受容体が豊富に存在する臓器から可溶化すると、いずれの受容体もGTP結合蛋白とカップルしている事が明かとなった。各々のロイコトリエンは受容体→G蛋白→ホスホリパ-ゼCの経路で細胞内ストアよりカルシウムイオンを放出させるが、Cに関しては、この他に細胞内レセプタ-を介してポタシウムチャンネルを開く可能性が示された。

The purpose of this year's research is to (1) clarify the cellular structure of biosynthetic enzymes and (2) analyze the cell membrane receptors of related substances. The protein is expressed in E. coli and purified in E. coli The purified antibody was identified as a protein with a molecular weight of 70K. The antibody was used for immunostaining of small intestine mucosa epithelium, smooth muscle of blood vessels and epithelial cells of blood vessels. The central nervous system, such as olfactory nerve cells, spinal anterior horn cells and so on, are found in the intestine. This is the first time that a cell has been used for a long time. (2)Analysis of three types of receptors (C,D, B), which bind energy to the whole body, are found in the lungs, lungs, hypophysis, heart, spleen and leukocytes. The binding protein is abundant in the receptor, soluble in the receptor, and soluble in the receptor. Each cell contains a receptor →G protein → G