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PEPカルボキシラ-ゼアイソザイム遺伝子のシンク機能発現に伴う発現調節機構

PEP羧化酶同工酶基因库功能表达相关的表达调控机制

基本信息

批准号：
02261211
负责人：
泉井桂
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

植物においてホスホエノ-ルピルビン酸カルボキシラ-ゼ(以下PEPCと略)は多彩な生理的役割をもち,C4植物のトウモロコシでは少くとも3種類のアイソザイムが存在するが、それらのシンク機能の発現に伴ってどのように変化するかは知られていない。発現調節機構を分子レベルで解明するために,今年度はC4光合成に関与するPEPC遺伝子の5'上流域のDNA断片を用いて下記の二種類の実験を行い,有用な知見を得た。(1)タバコのトランスジェニック植物体を用いる実験。すでにクロ-ン化しているトウモロコシのPEPC遺伝子の転写開始点から上流へ約Ikbおよび4kbまでを含むDNA断片をマ-カ-酵素遺伝子βーグルクロニダ-ゼ)の上流につないだものを調製した。これをタバコの葉由来のプロトプラストに導入して形質転換したのち,個体を再生させた。得られた植物体の各組織についてマ-カ-遺伝子の発現を調べた結果,1kbと4kbではともに葉緑体を含む光合成細胞における遺伝子発現を指令するに充分な情報すなわちプロモ-タ-活性をもつことが分かった。(2)ゲルシフト法による核由来のDNA結合タンパクの検索。上記の1KbのDNA断井をさらに制限酵素で断片化し,それぞれについて,核タンパクとの結合能を調べた。その結果少なくとも3種類の核タンパク(MNF1,MNF2a,MNF2b)が見出され、それぞれDNAの繰り返し配列に結合することがわかった。これらの結合因子は緑葉や黄化葉にはみとめられたが,茎や根にはみとめられず,組織特異的発現に関与する因子である可能性が示唆された。さらに,MNF2aは光により,むしろ減少する傾向がみとめられ,PEPC遺伝子の光誘導に関係している因子である可能性が示吸された。

The plant has a lot of trouble. (the following PEPC is brief). The colorful physiology of the plant is very colorful. There are many problems in the plant system, such as the number of plants, the number of cells, the number of cells in the plant. This year, the C4 photosynthesis and PEPC fragments in the upper basin of the river basin have been tested with the following two types of equipment. It is useful to know what you have learned. (1) make sure that the plant is used in the first place. The starting point for writing PEPC fragments is similar to that for DNA fragments, which contains DNA fragments, enzyme fragments, β-fragments, enzymes, etc.). The reason for this is that there is a problem in the shape and shape of the baby, so that the body can be regenerated. The results showed that 1 kb, 4 kb, 1 kb, 4 kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, 4kb, (2) to check the origin of the DNA and to combine the information of the system. In the last part of the 1Kb DNA cut-off system, the restriction enzyme was fragmented, and the combination of the enzyme and the enzyme was analyzed by the combination of energy and energy. The results show that there is a lack of information on the number of applications (MNF1,MNF2a,MNF2b), and the configuration of the configuration is combined with the performance of the DNA system. The combination of etiolation factors, etiolation factors, stem and root factors, tissue characteristics and the possibility of tissue characteristics indicate that there is a significant difference between them. In this case, the MNF2a light source is sensitive, and the PEPC sub-light guide is sensitive to the possibility of absorption.