C3-およびC4-植物のPEPカルボキシラーゼ遺伝子のクローニングとその解析

C3 和 C4 植物中 PEP 羧化酶基因的克隆和分析

• 批准号: 60225006
• 负责人: 泉井 桂
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60225006/
• 关键词: 【C_4】植物; 【C_4】光合成の遺伝子; ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ; 炭酸固定酵素; 遺伝子のクローニング; トウモロコシ; cDNA; DNA塩基配列

【C_4】植物は一般に【C_2】植物に較べて光合成的炭酸固定能が高いとされている。多くの有用な植物は【C_3】植物であるため、これらを【C_4】植物化することが分子育種の一つの夢となっている。同じ属の【C_3】植物と【C_4】植物とのかけ合わせ実験によって、後者に特有の遺伝子の数はさほど多くないことが示唆されている。しかしながら、これまでその遺伝子をクローン化した例がなかった。我々は、【C_4】光合成において空気中の炭酸ガスの捕集酵素として最も重要なホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ(PEPC)について、その遺伝子をクローン化し、構造を明らかにして、将来の分子育種に資することを目指している。本年度の主な成果を以下に記す。1.トウモロコシの葉よりmRNAを調製し、これをOkayama-Bergの方法に基いて、cDNAとし、大腸菌内での発現ベクターに組み込んで、cDNAライブラリーを得た。2.cDNAライブラリーより、PEPCのcDNAクローンを得るため、大腸菌のPEPC欠損突然変異株の表現型を相補するものを探し、 約8400の形質転換株より1株を得た。3.得られた形質転換体からはPEPC活性が検出され、そのPEPCは活性調節能および抗体との反応性からトウモロコシの【C_4】光合成に関与するものであることが確認された。得られたプラスミド(pM52)には約3RbpのcDNAが挿入されていた。4.pM52のcDNA部分の全塩基配列を決定し、PEPCの一次構造を求めた。翻訳領域から求めたPEPCの分子量は105540であった。得られた一次構造を、すでに決定している大腸菌およびラン藻のPEPCのそれらと比較し、特質を明らかにした。今後は、mRNAの5′-末端構造の解析および、ゲノムDNAのクローン化を行い、発現調節に関わる遺伝子部分を明らかにしていきたい。

[CCl4] plants in general [CCl2] plant carbonic acid produced by photosynthesis can be fixed with high energy. Multi-plant plants [CCl3] plant chemicals, plant chemicals [CCl4] plant chemicals, plant chemicals, molecular breeding, molecular breeding and molecular breeding. The plants of the same genus [Category 3] and [Cyste4] plants are of the same genus, and the other plants are endemic, the number of children, the number of children, and the number of endemic plants. I don't know. I don't know. I don't know what to do. We, [CCl4] photosynthesize carbon dioxide in the air to capture enzymes that are of the most important importance. The most important is PEPC, which is known to be sensitive, sensitive, accurate, accurate, and so on. The following is a record of the main results of this year. 1. We need to know that mRNA is sensitive, Okayama-Berg is sensitive, cDNA is sensitive, and that cDNA is effective. 2.cDNA, PEPC, cDNAs, PEPC, Daphnia Magna, Escherichia coli, Pectinomyces spp. 3. The results showed that the PEPC activity was detected, the PEPC activity was detected, the antibody was detected, the anti-sex was detected, and the light synthesis was confirmed. You may need to know that you need to enter the 3Rbp cDNA (pM52) into your account. 4.pM52 "cDNA" part of the full base configuration column "decision", PEPC "one time" to create a solution. The molecular weight of PEPC is 105540 μ m. You have to make it all at once, and you have to decide that you need to know more about the bacteria, the algae, the PEPC, the comparison, and the special information. In the future, mRNA 5-at the end of the end, you will analyze the data, and you will need to know that you are not going to make any changes. In the sub-section, you will need to know that you will not be able to do so.

项目成果

細胞工学. 5-6. (1986)

细胞工程。（1986）

生化学 (日本生化学会). 71-8. (1985)

生物化学（日本生物化学会）71-8（1985）。

Nucleic Acids Research. 14-4. (1986)

核酸研究。