权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

希土類錯体を抗体の標識に用いる免疫化学的測定法の開発

开发利用稀土配合物标记抗体的免疫化学测定方法

基本信息

批准号：
06241205
负责人：
宮入伸一
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

優れた分子識別能を有する抗体を利用する測定法に、簡便性ならびに迅速性に富むフローインジェクション分析法を組み合わせたフローインジェクション-イムノメトリックアッセイ(FIIMA)の開発を行なった。これは、予め標識抗体を固定化抗原に結合させ、測定対象物(抗原)の注入に伴い溶出される標識抗体を検出する方法で、試料の連続注入が可能な測定法である。まず、発蛍光性のフルオレセインで標識した抗17α-ヒドロキシプロゲステロン抗体を用いて検討したところ、抗原の注入量に依存して溶出ピークの蛍光強度が増大した。また、これらの間に良好な直線関係が認められたことから、本法が原理的に成り立つことは確認されたが検出限界は10ngであった。引き続き、血中薬物濃度測定を必要とする強心性ステロイドのジギトキシンおよびジゴキシンを測定対象として感度に優れるFIIMAの開発を企てた。FIIMAの高感度化には、ハプテンの工夫と標識試薬の選択が重要である。ハプテンとしては、ブリッジの空間的大きさや結合するタンパク側の官能基の種類が異なり、かつブリッジヘテロロジーの適用が可能なものを用いることとし、ゲニンの3位ヘミスクシネート誘導体に加え、かさ高くかつチオール基と結合する4-マレイミドベンゾイル誘導体を新たに合成した。現在、これらハプテン4種をウシ血清アルブミンとの結合体へと導き、Freundの完全アジュバントとともにウサギ背部皮内に反復投与して抗体の調製を試みている。また、標識試薬としては、鋭敏な蛍光特性を示す希土類金属を含有する化合物の利用を企て、環状化合物の希土類金属錯体を種々検討中である。今後、FIIMAにおける感度および特異性に及ぼすブリッジの影響を明かにするとともに、フロー中でも安定なタンパクの希土類金属標識試薬を用いて薬物のFIIMA系の基礎的検討を行なう予定である。

The development of FIIMA assay is characterized by its simplicity, rapidity, and specificity. These include methods for identification of antibodies, immobilized antigen binding, injection and dissolution of target (antigen), detection of labeled antibodies, continuous injection of sample, and possible detection. The light intensity of anti-17α-DNA-specific antibody was increased depending on the amount of antigen injected. A good linear relationship between the two is recognized. The principle of this law is established. The limit is confirmed. The development of FIIMA is necessary for the determination of plasma concentrations and for the determination of plasma concentrations. FIIMA's high sensitivity, time and identification test selection are important. The functional groups on the side of the compound vary in type, application and possible use. The 3-position compound of the compound is added to the 4-position compound of the compound. Now, four kinds of antiserum and antiserum complexes are tested by repeated administration of antiserum and antiserum to the back of the body. The use of compounds containing rare earth metals and the study of species of rare earth metals containing cyclic compounds are discussed in this paper. In the future, the sensitivity and specificity of FIIMA and the influence of FIIMA on the identification of rare earth metals will be discussed in detail.