ペルオキシソーム蛋白質の局在化機構の解析

过氧化物酶体蛋白定位机制分析

• 批准号: 06248226
• 负责人: 三浦 恵
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06248226/
• 关键词: アシルCoAオキシダーゼ; ペルオキシソーム; ウリカーゼ; 蛋白質の局在化

本研究はラット肝臓のペルオキシソーム蛋白質の局在化機構を分子レベルで解明する。目的遂行の第一歩として申請者はアシル-CoAオキシダーゼ(AOX)並びにウリカーゼを高度に純化したラット肝臓ペルオキシソームに取り込ませる系(試験管内インポート系)を確立し、AOXのカルボキシル末端3残基Ser-Lys-Leu-COOH(SKL配列)、ウリカーゼのカルボキシル末端3残基Ser-Arg-Leu-COOH(SRL配列)がペルオキシソーム局在化シグナルの最少単位であることを証明し、さらに両者は同経路でペルオキシソームへ移行することを証明してきた。本年度はこれら蛋白質のペルオキシソームへの移行に際しエネルギー源としてATPが利用されていることを明らかにすると共に、ウサギ網状赤血球溶血液中にペルオキシソーム移行を促進する蛋白性の因子が存在することを明らかにした。このことはラット肝細胞中のサイトソ-ルにも同因子が存在することを非常に強く示唆するものであるが、現在のところット肝細胞中のサイトソ-ルにはペルオキシソームへの移行を促進する活性は未だ検出できていない。一方、SKL配列のレセプターがペルオキシソームの膜上にあると仮定し、純化したペルオキシソームを可溶化後、SKL配列を含む合成ペプチドをリガンドにしたアフィニティークロマトグラフィーにより検索を試みた結果、分子量28Kの蛋白質が同定できた。しかしながらこの蛋白質は詳細な解析の結果ウリカーゼであることが判明し、現在検索の対象をペルオキシソームとラット肝サイトソ-ルに絞って解析中である。また上記蛋白質とは異なるペルオキシソーム局在化シグナルを持つ3-ketoacy-CoA thiolaseについても試験管内インポート系の確立に成功した(J.Biochem.115,1064-1068)。今後これらシグナルの異なる蛋白質が全く異なった経路または、ある程度共通の経路でペルオキシソームへ移行するのかを明らかにする準備が出来たものと評価される。

This study aims to clarify the molecular structure of protein in the molecular structure of liver tissue. Objective To carry out the first step, the applicant should select a system that is highly purified from the CoA and AOX.(In the test tube, the three residues Ser-Lys-Leu-COOH(SKL alignment), Ser-Arg-Leu-COOH(SRL alignment), Ser-Arg-Leu-COOH, Ser-Arg-Leu-This is the first time I've ever seen a woman This year, the source of protein migration and ATP utilization in reticulocyte hemolyte were identified. The presence of these factors in liver cells is strongly indicated by the presence of these factors in liver cells, and the activity of these factors in liver cells is strongly indicated by the presence of these factors. After the dissolution of SKL alignment, SKL alignment was synthesized with a molecular weight of 28K protein. The protein was analyzed in detail. The results showed that the protein was analyzed in detail. The protein was analyzed in detail. Successful establishment of a 3-ketoacy-CoA thiolase system for protein selection in vitro (J. Biochem. 115, 1064 -1068). In the future, all kinds of proteins will be evaluated according to the common pathway.