ペロオキシソーム蛋白質の局在化機構の解析

过氧化物酶体蛋白定位机制分析

• 批准号: 05252228
• 负责人: 三浦 恵
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05252228/
• 关键词: ペルオキシソーム; 蛋白質の局在化; ウリカーゼ; アシル-CoAオキシダーゼ

本研究はラット肝臓のペルオキシソーム蛋白質の局在化機構を分子レベルで解明する。目的遂行の第一歩として申請者はアシル-C_oAオキシダーゼ(AOX)を高度に純化したラット肝臓ペルオキシソームに取り込ませる系(試験管内インポート系)を確立し、AOXのカルボキシル末端3残基Ser-Lys-Leu-COOH(SKL配列)がペルオキシソーム局在化シグナルの最小単位であることを証明してきた。本年度はカルボキシル末端にSKL類似配列であるSer-Arg-Leu-CooH(SRL配列)を持つウリカーゼについて同じく試験管内インポート系を確立した。さらにこの系を利用してAOXのカルボキシル末端3残基を含む合成デカペプチドが効率良くウリカーゼのペルオキシソームへの移行を阻害することからウリカーゼはAOXと同じ経路でペルオキシソームへ移行することを示唆すると同時に、oligo-directed mutagenesisによりSRL配列を欠失した変異蛋白質や、ArgをGluに置換した変異蛋白質はペルオキシソームへの移行が出来なくなることからウリカーゼにおいてもカルボキシル末端3残基SRL配列がペルオキシソーム局在化シグナルとして機能していることを証明した。以上のウリカーゼに関する仕事は現在、Eur.J.Biochemに投稿中である。一方、試験管内インポート系がウリカーゼについても確立されたことによりSKL配列、SKL類似配列の受容体の解析ならびに蛋白質の局在化に関与する未知の因子の検索のための有力な戦略手段を構築できたものと評価される。

This study aims to clarify the molecular structure of protein in the molecular structure of liver tissue. Objective To establish the first step of the process, which is to purify AOX (AOX) to a high degree, and to demonstrate the minimum position of AOX (AOX) in the final 3 residues Ser-Lys-Leu-COOH(SKL). This year, the Ser-Arg-Leu-Coo (SRL) alignment system was established. This system utilizes AOX to contain the terminal 3 residues of the protein sequence and to synthesize the protein sequence. The protein sequence has a high resistance to the migration of AOX and SRL. Arg is the most common form of protein in the world. Eur. J. Biochem. A powerful strategy for the identification of unknown factors in protein localization and analysis of SKL alignment and SKL-like alignment receptors was developed.