グルタチオントランスフェラーゼP遺伝子の発現を支配する転写因子のクローニング

谷胱甘肽转移酶P基因表达调控转录因子的克隆

• 批准号: 06261235
• 负责人: 奥田 晶彦
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06261235/
• 关键词: 転写; エンハンサー; cDNAライブラリー; 肝癌; 酵母

肝癌特異的に発現するグルタチオンs-トランスフェラーゼ(GST-P)遺伝子の発現は私たちが同定したエンハンサー、GPEIによって支配されている。そこで、GPEIエンハンサーに結合し、GST-P遺伝子の発現を促進する転写因子をクローン化する事を目標に研究を始めた。私たちはまず、酵母の遺伝学を駆使してcDNAのクローン化を目指すことにした。すなわち、HIS3遺伝子に変異を持つ酵母に本来のエンハンサー領域を酵母ではレプレッサーとして働くことが明らかになったGPEIエレメントと置き換えたHIS3遺伝子を導入したところ、この遺伝子からの転写レベルが低いためにこの遺伝子を持つ酵母もHis^-のフェノタイプを示した。そこで、私たちは、さらにこの酵母にcDNAライブラリーを導入すれば、GPEIエレメントに結合する転写因子が発現した場合、その酵母に限ってHis^+のフェノタイプを示すのではないかと考えた。事実、胎児性癌細胞であるF9細胞より調整したcDNAライブラリーをスクリーニングしたところ、His^+のフェノタイプを示す酵母のコロニーが得られた。その酵母からcDNAを回収し塩基配列を決定したところ過去に報告のない新しいクローンであることが明らかになった。得られたcDNAをUTF1と命名したが、生化学的解析から確かにUTF1はHIS3遺伝子からの転写を促進することが明らかになった。但し、DNAへの結合活性が認められないことが明らかになった。現在、UTF1のGPEIエレメントとの相互作用等について検討を加えている。

The development of hepatoma-specific (GST-P) genes is regulated by GPEI and other factors. GST-P gene expression promotion and gene transformation The gene expression of yeast and cDNA is the key to the development of yeast. In addition to the above, it is also possible to use a variety of different types of yeast, such as yeast, yeast, In addition, in the case where the yeast cDNA fragment is introduced, the GPEI fragment is bound to the cDNA fragment, and in the case where the yeast fragment is bound to the cDNA fragment, the cDNA fragment is bound to the cDNA fragment. F9 cells are regulated by the cDNA sequence, and the cDNA sequence of yeast cells is regulated by the cDNA sequence. The DNA sequence of the yeast is determined by the sequence of DNA sequences. UTF-1 and UTF-3 cDNA were identified and analyzed in biochemistry. However, DNA binding activity is recognized. Now, UTF1 and GPEI