初期胚転写コアクティベーターUTF1のレチノイン酸レセプター補助因子としての役割

早期胚胎转录辅激活因子 UTF1 作为视黄酸受体辅因子的作用

• 批准号: 11154223
• 负责人: 奥田 晶彦
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11154223/
• 关键词: 哺乳動物初期胚; EC細胞; ES細胞; 転写補助因子; コアクティベーター; レチノイン酸レセプター

古くからレチノイン酸レセプター(RAR)によって自己調節されるRARβ遺伝子の発現には初期胚特異的に発現する転写補助因子が必要であることが知られている。私たちは、自分たちがクローン化した初期胚特異的転写補助因子UTF1の中にステロイドホルモンレセプターの補助因子として機能するタンパク質に共通してみられるLxxLLモチーフが2つ存在しており、かつ、それらがヒトUFT1でも保存されるという事実から、UFT1がそのタンパク質に相当するのではないかと考えこの研究に着手した。事実、この研究費を補助された平成11年度の間に、私たちはGSTプルダウン法等によりUTF1とRARが直接結合することを明らかにした。また、このUTF1のRARとの結合は、SRC-1等の他のステロイドホルモン補助因子とは違ってリガンド及びレセプターのAF2領域、いずれに対しても非依存性であることが明らかになった。また、トランスフェクションを用いた実験系により、UTF1が確かにRARβ遺伝子プロモーター上にあるRAR結合配列を介して転写を促進する性質を持つことを明らかにした。また、これらとは別の角度からの研究としてジーンターゲティングを用いた解析も行っている。すなわち、UTF1遺伝子破壊用のターゲティングベクターを構築し、それを用いて一対のUTF1遺伝子のうち、1つが欠失したF9EC細胞を樹立した。現在、高濃度のG418を用いる方法等を用いて2番目のUTF1遺伝子座の破壊を試みてる。以上、要約すると、現在までにUTF1がRARと結合し、RARβ遺伝子プロモーターを活性化するという能力を持ったタンパク質であることを明かにすることができた。今後、UTF1遺伝子ダブルノックアウトEC細胞を樹立することにより、現在までに得ているデータの生理的意義を確定したいと考えている。

It is necessary to write a supplementary factor for the development of RARβ gene and the development of embryo specific RAR gene. In the early stage of the transformation of private and self-divided cookies, the specific write subsidy factor in UTF1 is the subsidy factor and function of the local interface monitor. The common nature of the UTF1 is that LxxLL monitor 2 exists, is stored, and is stored in UFT1. In fact, the UFT1 has a very similar quality. This research is based on this. The research fee was paid in the year 2011, and the UTF1 and RAR were directly combined. The combination of RAR, UTF-1, SRC-1, etc., and other factors such as support factors, violation of the rules and regulations of the AF2 field, and internal control are independent. UTF1 is the correct RAR beta gene. UTF 1 is the correct RAR beta gene. UTF 1 is the correct RAR beta gene. The research and analysis of this paper are carried out from different angles. UTF-1 gene expression system is used to construct UTF-1 gene expression system, and UTF-1 gene expression system is used to construct UTF-1 gene expression system. Now, high concentration of G418 in the middle of the method, etc. to use the middle of the 2-point UTF1 gene block to break the test The above offers are available in UTF1, RAR beta, RAR beta, RAR beta In the future, UTF-1 gene expression will be used to determine the physiological significance of EC cells.

项目成果

Masazumi Nishimoto: "The gene for the embryonic stem cell coactivator UTF1 carried regulatory element which selectively interacts with a completex composed of Oct-3/4 and Sox-2"Mol. Cell. Biol.. 19. 5453-5465 (1999)

Masazumi Nishimoto：“胚胎干细胞共激活因子 UTF1 的基因携带调节元件，选择性地与由 Oct-3/4 和 Sox-2 组成的完整体相互作用”Mol。

Akiko Fukushima: "Carboxy-terminally truncated from of a coactivator UFT1 simulates iranscription from a vaciety of gene promoters through the TATA Cox"Biochem. Biophs. Res. Cmmun.. 258. 519-523 (1999)

Akiko Fukushima：“共激活子 UFT1 的羧基末端被截断，通过 TATA Cox 模拟基因启动子空位的转录”Biochem。

Shingo Yokosawa: "Induced expression, localization, and chromosome mapping of gene for the TBP-interacting protein 120A"Biochem. Biophs. Res. Cmmun.. 266. 123-128 (1999)

Shingo Yokosawa：“TBP 相互作用蛋白 120A 基因的诱导表达、定位和染色体作图”Biochem。

Akira Orimo: "Underdeveloped uterus and rediced estrogen responsivenses in mice with discruption of the estrogen-responsive finger protein gene, which is a direct target of estrogen receptor α"Proc. Natl. Acad. Sci. , USA. 96. 12027-12032 (1999)

Akira Orimo：“雌激素反应指蛋白基因被破坏，导致小鼠子宫发育不良和雌激素反应减弱，该基因是雌激素受体 α 的直接靶点”，Proc. Acad. 96。 1999）