ホメオドメインタンパク質の標的遺伝子の分離と機能解析

同源结构域蛋白靶基因的分离和功能分析

• 批准号: 06266204
• 负责人: 黒岩 厚
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06266204/
• 关键词: 転写因子; ホメオボックス; ホメオドメイン

Hox遺伝子群は転写因子をコードし、遺伝情報カスケードの下流にある遺伝子群の転写制御を通じて形態形成を制御しているが、これら標的遺伝子の実体、制御方式については未解明である。私たちはクロマチン免疫沈降法によってHoxa-4の標的遺伝子の探索を行っている。既にこの方法によって分離された標的遺伝子について、cDNAクローンを分離し塩基配列決定を行ったところ、特に酵母のYAK1に最も高い類似性を示すプロテインキナーゼドメインが見いだされた。YAK1はcAMPを介した細胞増殖系で抑制的に機能する。酵母のyak1相補性について検討を行ったところ、この遺伝子はyak1こ相補する事が判明した。このことからHox遺伝子は細胞増殖の制御に関わっていることが示唆され、この遺伝子はYAK1の脊椎動物ホモログとしてVYAKと命名された。VYAKは胚のほとんどの組織で弱い発現が観察されたが、いくつかの組織では強い発現が特徴的に見いだされた。強い発現は中腎間充織、脊髄神経節、鰓弓の特定の組織、肢芽間充織、神経管の外套層で観察された。これらの強い遺伝子発現領域はHox遺伝子発現領域とオーバーラップしているが、体の前後軸に沿った発現の差は認められなかった。VYAKはHoxa-4の特異的な標的遺伝子というよりもHox遺伝子群の標的遺伝子といった方がよいと考えられる。クロマチン免疫沈降法で得られたDNA断片は、最終エクソンの一部とそれより5'側のイントロンを含んでいた。この領域を含むゲノム断片をマウスβグロビン最小プロモーターに連結し、マウス奇形腫細胞P19とともにコトランスフェクションすると、転写量が4-5倍に増加した。このことからこのDNA断片は生体内においてもホメオドメインタンパク質の標的になることが判った。

The Hox subgroup writes the factor, the situation, the dirt, the writing, the configuration, the control, the control. To explore the child of the immune sedimentation method (immune sedimentation method) and the Hoxa-4 method in private. Not only does the method determine the number of rows, but also shows the highest similarity of the yeast YAK1 in terms of the number of children, the cDNA, and the highest similarity of the yeast system. YAK1 cAMP induces the inhibition of cytophagy by cell culture. Yeast, yak1, yak1, yeast, yeast. This is the first time that Hox has been identified, and that the VYAK has been named after him. The VYAK health care system is responsible for the weak monitoring of the disease, and the monitoring of the organization for the detection of specific health problems. It is important to see the internal tissue, spinal cord, bow-specific tissue, limb bud tissue, and the outer layer of the tube to observe the tissue. This is the first time that you can see that there is a difference between the front and back of the body, and you can see that there is a difference between the front and back of the Hox. The child of VYAK Hoxa-4 is the child of the Hox subgroup. The DNA fragment was obtained by immuno-sedimentation method, and the most important one was obtained by immunoprecipitation method. In the field of communication, the number of fragments is small, the number of fragments, the minimum number of fragments, the number of singularities, the number of cells P19, the volume of writing, and the amount of writing are 4-5 times as much as 4-5 times. The DNA fragments were broken in vivo, and the diagnosis was made in vivo.

项目成果

Yokouchi,Y.: "Coordinated expression of Abd-B subfamily genes of the HoxA cluster in the developing digestive tract of chick embryo." Developmental Biology. 168(in press). (1995)

Yokouchi,Y.：“HoxA 簇的 Abd-B 亚家族基因在鸡胚消化道发育中的协调表达。”