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タバコ培養細胞系におけるアミロプラストの誘導と細胞肥大のホルモンによる制御

培养烟草细胞系中淀粉体诱导和细胞肥大的激素控制

基本信息

批准号：
06269206
负责人：
酒井敦
金额：
$ 1.79万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

タバコ培養細胞BY-2は、合成オーキシンである2,4-D(0.2mg/l)を含む通常の培地中では活発に細胞増殖を行い、その色素体は培養の全期間を通じて未分化な原色素体の状態を保つ。一方、2,4-Dを含まず、合成サイトカイニンであるBA(1mg/l)を添加した改変培地中では細胞はほとんど増殖せずに著しく大型化し、色素体は大量のデンプンを蓄積してアミロプラストに変換する(Sakai et al.1992)。今年度は、BY-2細胞の植物ホルモンに対する応答を詳細に解析し、アミロプラストの分化誘導に関しては-2,4D,+BAの条件が最良であることを確認した。しかし、ホルモンを全く含まない(-2,4-D,-BA)培地中でもデンプンの蓄積が認められることから、BY-2のアミロプラスト分化誘導では2,4-Dの除去が第一の要因であり、BAは2,4-Dの除去によって生じる変化を促進していると考えられる。それぞれのホルモンに対する応答を調べた結果、2,4-Dは細胞増殖を促進し、デンプン蓄積を抑制すること、BAは逆に細胞増殖を抑制し、デンプン蓄積を促進すること、そしてこれらの反応はホルモン濃度依存的であることが確認された。2,4-DとBA以外のオーキシンやサイトカイニンも類似の作用を示すことから、これらはオーキシン、サイトカイニンに共通の効果であると考えられる。各種培養条件を比較すると、細胞増殖率の低下とデンプン蓄積量の増大は平行関係にあった。しかし、真核型ポリメラーゼαの阻害剤であるアフィディコリンを添加して細胞の増殖を強制的に停止させても、デンプンの蓄積量は培地の種類ごとに明らかに異なっていた。したがって、デンプンの蓄積は増殖率の低下によって二次的にもたらされるのではなく、ホルモンにより独自の制御を受けていると考えられる。また、単離色素体核を用いたin vitroアッセイ系によりアミロプラスト分化過程における色素体ゲノムの機能変化を調べた結果、転写・複製活性ともに不活発であることが明らかになった。

By-2, synthesis, 2,4-D(0.2mg/l), including the growth of cells in normal culture, and the state of undifferentiated protoplasts during the whole culture period. The addition of BA(1mg/l) to the medium containing 1, 2,4-D resulted in the accumulation of large amounts of pigment in the medium (Sakai et al.1992). This year, we analyzed in detail the responses of BY-2 cells to plant cells, and confirmed that-2, 4D,+BA is the best condition for differentiation induction of Amiroplast. By-2, the accumulation and differentiation of the protein in the culture medium were induced by the elimination of the first factor of 2,4-D and the elimination of the second factor of BA. 2, 4-D cell growth inhibition, BA cell growth inhibition, BA cell accumulation enhancement, 2, 4-D cell growth inhibition, BA cell growth inhibition, BA cell accumulation inhibition, BA cell growth inhibition, BA cell growth inhibition, BA cell 2, 4-D: BA: The outer right side of the box, the upper right side of the box, the lower right side of the box, the upper right side of the box, the lower right side of the box, the upper right side of the box, the lower right side of the box, the upper right side of the box, the right Comparison of various culture conditions resulted in a decrease in cell proliferation and an increase in cell accumulation. The growth of the cell is affected by the growth of the cell. The accumulation and growth rate of the two species are low, and the accumulation and growth rate of the two species are low. In addition, in the process of differentiation, the functional transformation of the pigment body is regulated, and in the process of replication, the activity is inactivated.