細胞増殖・分化のシグナル伝達におけるMAPキナーゼカスケードの機能

MAP激酶级联在细胞增殖和分化信号转导中的作用

• 批准号: 06283214
• 负责人: 西田 栄介
• 金额: $ 20.48万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06283214/
• 关键词: MAPキナーゼ; シグナル伝達; 初期胚発生; ストレス応答; 核内移行; 中胚葉誘導; MAPキナーゼキナーゼ; 細胞内シグナル伝達; キナーゼカスケード; Ras; Raf; Mos; 中和抗体

1.種々の実験から脊椎動物の初期胚発生の中胚葉誘導において、MAPキナーゼカスケードが必須の役割を果たすことを初めて明らかにできた。また、初期胚発生全体におけるMAPキナーゼの役割を調べるために、2細胞期の胚にCL100mRNAを顕微注入したところ、尾部並びに後部の欠失したオタマジャクシとなった。この結果は、MAPキナーゼカスケードの初期胚発生における重要性をさらに示した。2.高浸透圧刺激によって活性化されるMEKK→XMEK2/SEK1/MKK4→SAPキナーゼというキナーゼカスケードが存在することを示した。また高浸透圧刺激によって古典的MAPキナーゼのカスケード、すなわちRaf-1、MAPKK及びMAPキナーゼが活性化することも明らかにした。3.高浸透圧刺激によって活性化されるキナーゼカスケードの生化学的解析を行い、SAPキナーゼ活性化因子としてXMEK2/SEK1/MKK4以外の新しい因子が存在することを初めて明らかにした。4.活性型MAPキナーゼ特異的抗体(P抗体と仮に呼ぶ)を作製することに成功した。P抗体は、スレオニンとチロシン両アミノ酸残基がリン酸化されて活性型となったMAPキナーゼのみを特異的に認識する抗体であることを種々の手法によって証明した。P抗体を用いた細胞染色の実験から、静止期細胞においてはMAPキナーゼは全く活性化しておらず、増殖刺激を細胞が受けるとMAPキナーゼが細胞質において活性化し、その後活性化したMPAキナーゼが核内へ移行することが明らかとなった。

1. The early embryo development of vertebrate species is induced by mesoderm, MAP, and fruit. The expression of CL100 mRNA in the early embryonic stage was microinjected into the embryonic stage, and the expression of CL100 mRNA in the tail was microinjected into the embryonic stage. These results demonstrate the importance of MAP in the early stages of development. 2. MEKK→ XMEK2/SEK1/MKK4 →SAP High osmotic pressure stimulation can activate classical MAP, Raf-1, MAPKK and MAP. 3. The biochemical analysis of high osmotic pressure stimulation and activation factors, such as SAP, XMEK2/SEK1/MKK4 and other new factors exist. 4. Active MAP was successfully produced by specific antibodies (P antibodies). P antibodies are identified by the following methods: P antibody is used in cell staining, resting cells, MAP, complete activation, proliferation stimulation, cell activation, MPA, cytoplasmic activation, post-activation, nuclear migration, etc.

项目成果

Gotoh,Y: "Involvement of the MAP kinase cascade in Xenopus mesoderm induction" EMBO J. 14(in press). (1995)

Gotoh,Y：“爪蟾中胚层诱导中 MAP 激酶级联的参与”EMBO J. 14（印刷中）。

Gotoh,Y: "Characterization of recombinaut Xenopus MAP kinase kinase mutated at potential phosphorylation sites" Oncogene. 9. 1891-1898 (1994)

Gotoh，Y：“在潜在磷酸化位点突变的重组非洲爪蟾 MAP 激酶激酶的表征”Oncogene。

Moriguchi, T.: "Activation of two isoforms of mitogen-activated protein kinase kinase in respones to epidermal growth factor and nerve growth factor." Eur. J. Biochem.234. 32-38 (1995)

Moriguchi, T.：“丝裂原激活蛋白激酶激酶的两种亚型的激活对表皮生长因子和神经生长因子的反应。”

Moriguchi, T.: "Evidence for multiple activators for stress-activated protein kinases/c-Jun amino-terminal kinases. Existence of novel activators." J. Biol. Chem.270. 12969-12972 (1995)

Moriguchi, T.：“应激激活蛋白激酶/c-Jun 氨基末端激酶的多种激活剂的证据。新型激活剂的存在。”

Irie,K: "Stimulatory effects of yeast and mammalian 14-3-3 proteins on the Raf protein kinase" Science. 265. 1716-1719 (1994)

Irie,K：“酵母和哺乳动物 14-3-3 蛋白对 Raf 蛋白激酶的刺激作用”科学。