MAPキナ-ゼのG_0/G_1期及びM期における活性化と機能
G_0/G_1和M期MAP激酶的激活和功能
基本信息
- 批准号:03152035
- 负责人:
- 金额:$ 2.56万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
- 财政年份:1991
- 资助国家:日本
- 起止时间:1991 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
MAPキナ-ゼは,細胞周期のG_0/G_1期及びM期の細胞内シグナル伝達において機能するセリン/スレオニンキナ-ゼである。今年度,我々はM期におけるMAPキナ-ゼの活性化がM期開始のマスタ-制御因子であるMPF(M期促進因子)によって支配されていることを,Xenopus卵へのMPFのマイクロインジェクションと無細胞系システムによって明らかにした。また,MAPキナ-ゼは,自身のチロシン並びにスレオニン/セリン残基がリン酸化されて初めて活性化するユニ-クなキナ-ゼであるが,その直接の上流の活性化因子をXenopus M期卵から同定ー精製することに成功した。活性化因子は,分子量45Kのリン酸化蛋白質で,そのMAPキナ-ゼ活性化活性は,ホスファタ-ゼ2A処理により失活した。したがって,活性化因子もまたリン酸化を受けて活性化することが推定された。この活性化因子が本当に細胞内で機能していることを,精製活性化因子のXenopus卵へのマイクロインジェクションによって証明した。さらに,この活性化因子の活性化がMPFによって支配されていること,即ち,活性化因子がMPFからMAPキナ-ゼに至るリン酸化カスケ-ドを媒介する因子であること,を証明した。哺乳類培養細胞のG_0/G_1期で細胞増殖因子刺激でMAPキナ-ゼが活性化する場合の活性化因子についても,4段階のカラムクロマトグラフィ-により部分精製することに成功した。この哺乳類G_0/G_1期のMAPキナ-ゼ活性化因子は,上記のXenopus M期活性化因子と生化学的性質並びに物理化学的性質が非常に類似していた。この結果は,G_0/G_1期とM期のどちらにおいても,同一ないしは非常に近縁の活性化因子の活性化を経てMAPキナ-ゼが活性化することを示唆した。M期のMAPキナ-ゼのタ-ゲットについて,我々の予備的実験で,有力な候補が見い出されている。現在,同定・精製を進めている。
MAP This year, we have reversed the M-phase MAP activation and the M-phase initiation control factor MPF(M-phase promoter) regulation. Xenopus ovum MPF is a cell-free cell line. The MAP is activated directly by its own amino acid residues and purified by its own amino acid residues, and the active factors in Xenopus M phase are purified successfully. Activation factor: 45K molecular weight acidified protein, MAP-2A treatment inactivated. The activation factor was estimated to be a factor in the activation of the enzyme. This activation factor is essential for the intracellular function of Xenopus oocytes. In addition, the activation of these activation factors is controlled by MPF, which proves that activation factors can be mediated by factors ranging from MPF to MAP. Mammalian cells in G_0/G_1 phase were stimulated by cell growth factors, and activated factors in G_0/G_1 phase were purified successfully. The G_0/G_1 MAP activation factor is similar to the Xenopus M activation factor described above in biochemical and physicochemical properties. The results showed that the activation of MAP in G_0/G_1 phase and M phase was similar. M period MAP-- Now, the same set·refined into.
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Gotoh,Y.: "In vitro effects on microtubule dynamics of purified Xenopus M phase-activated MAP kinase." Nature. 349. 251-254 (1991)
Gotoh,Y.:“纯化的非洲爪蟾 M 期激活 MAP 激酶对微管动力学的体外影响。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Hoshi,M.: "MAP kinase-catalyzed phosphorylation of microtubule-associated proteins,MAP2 and MAP4,induces their functional alteration." Eur.J.Biochem.(1992)
Hoshi,M.:“MAP 激酶催化微管相关蛋白 MAP2 和 MAP4 的磷酸化,诱导它们的功能改变。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Nishida,E.: "MAP kinase and cytoskeleton in the mitogenic signal transduction." Int.Rev.Cytol.(1992)
Nishida,E.:“有丝分裂信号转导中的 MAP 激酶和细胞骨架。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Matsuda,S.: "Xenopus MAP kinase activator:identification and function as a key intermediate in the phosphorylation cascade." EMBO J.(1992)
Matsuda,S.:“非洲爪蟾 MAP 激酶激活剂:作为磷酸化级联中关键中间体的鉴定和功能。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Gotoh,Y.: "Xenopus M phase MAP kinase:isolation of its cDNA and activation by MPF." EMBO J.10. 2661-2668 (1991)
Gotoh,Y.:“非洲爪蟾 M 期 MAP 激酶:其 cDNA 的分离并通过 MPF 激活。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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