超好熱菌のストレスタンパク質とその応答

超嗜热应激蛋白及其反应

• 批准号: 07253223
• 负责人: 香川 靖雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07253223/
• 关键词: Hyperthemophile; Chaperone; HSP70; Heat shock protein; racemase; ATPase; archaea; renaturation

超好熱菌は単にその極限環境のみでなく、イントロンやヒストンを持つ原核生物として従来の常識を覆す存在である。まず超好熱菌の培養法とDNA抽出法の困難を克服した。新培養は高圧を要せず、また集菌の邪魔になる粉末硫黄をシスチンに変えた。本研究では超好熱菌のDesulfurococcusの分子シャペロンの遺伝子をクローニングし解明その遺伝子構造を決定した(Kagawa, Y. et al.: Biochem. Biophys. Res. Commun. 214: 730-736, 1995)。この超好熱菌の極度に安定なシャペロンは他の常温菌の複雑な要素と異なり、僅か一種のサブユニットのオリゴマーで、変性した常温生物酵素(リゾチーム)や超好熱菌酵素類を再生させ活性を回復できる点で注目される。その構造は古畑菌および哺乳類のt-複合体ペプチドと類似の構造であって、常温菌や従来の好熱菌(75℃程度の生育温度)のHSP60とは殆ど共通の構造は無かった。しかし、その相同構造部分はequat orialに集中し、ペプチド主鎖との作用点がここにあると考えられる。常温菌の重要なシャペロンであるHSP70の類似遺伝子の捜索の過程でアスパラギン酸ラセマーゼ遺伝子が単離され、塩基配列決定にも成功した。この酵素はそれ自体がシャペロン活性の一種を持つと推定されているので、実用化を目指して大量発現を行い、活性を検討している。さらにエネルギー変換の中心的膜酵素であるATPaseの遺伝子遺伝子のクローニングにも成功した。この酵素はそれ自体でシャペロン活性を持つので、この酵素の大腸菌内での大量発現にも成功した。これは極めて高い特異性を持つ。

Super-fine bacteria have been found to exist in extreme environments, such as prokaryotes and prokaryotes. Overcoming the difficulties of culture and DNA extraction of super-hot bacteria The new culture requires high pressure, high temperature, and high temperature. This study determined the molecular structure of Desulfurococcus sp.(Kagawa, Y. et al.: Biochem. Biophys. Res. Commun. 214: 730-736, 1995)。The ultra-good bacteria are extremely stable and stable, and the regeneration activity of other normal temperature bacteria is different. There is only one kind of enzyme, which is very stable and stable, and the regeneration activity of ultra-good bacteria enzymes is different. The structure of HSP60 is similar to that of T-complex of ancient bacteria and mammals. The structure of HSP60 is similar to that of T-complex of mammals. The same structural parts are concentrated in the equal orial, and the main lock and the action point of the selection are different. The process of searching for HSP70-like genes in normal temperature bacteria is successful in determining the sequence of genes. The enzyme is self-contained, active, putative, practical, and active. The membrane enzyme in the center of the enzyme is successfully transformed. The enzyme was successfully expressed in large quantities in E. coli. This is a very high level of specificity.

项目成果

Sato, M., kagawa, Y. et al.: "ATP-hydrolyzing excitation state of the reconstituted complex of ATP Synthase from thermophilic.." Journal of Biochamistry. 117. 113-119 (1995)

Sato, M.、kakawa, Y. 等人：“嗜热 ATP 合酶重构复合物的 ATP 水解激发态。”《生物化学杂志》。

Kagawa,Y.,Ohta,T.,et al.: "Gene of heat shock protein of sulfur-dependent archeal hyperthermopile Desulfurococcus." Biochem.Biophys.Research Commun.214. 730-736 (1995)

Kakawa，Y.，Ohta，T.，et al.：“硫依赖性古超热电堆脱硫球菌的热休克蛋白基因。”

Burgard, S., Kagawa, Y. et al.: "Investigating the nucleotide binding sites of F1-ATPase and its subunits." Biophysical Journal. 68. A320 (1995)

Burgard, S.、Kakawa, Y. 等人：“研究 F1-ATPase 及其亚基的核苷酸结合位点。”

Takai, D., Inoue, Kagawa, Y. et al: "Age-associated change of mitochondrial translation and respiratory change in mouse brain." Biochem. Biophys. Research Commun.217(in press). (1995)

Takai, D.、Inoue、Kakawa, Y. 等人：“小鼠大脑中线粒体翻译和呼吸变化的年龄相关变化。”

Kagawa,Y.: "Survey of Biochemical Education in Japanese Univ." Biochemical Education. 23. 127-129 (1995)

Kakawa,Y.：“日本大学生化教育调查”