細胞膜脂質のコレスタノール置換による神経細胞死のメカニズム

胆甾烷替代细胞膜脂质导致神经元细胞死亡的机制

• 批准号: 07264212
• 负责人: 脊山 洋右
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07264212/
• 关键词: 脳腱黄色腫症; CTX; コレスタノール; 神経細胞死; プルキンエ細胞

脳腱黄色腫症の中枢神経症状は、中枢神経にコレスタノールが蓄積し、最終的に神経細胞死を引き起こすためと我々は考えている。そこでこの機構を解明するために正常ラット小脳顆粒細胞に対するコレスタノールの与える細胞障害性を調べた。[方法]1.Wistar系ラットオス5週齢を1%コレスタノール含有食、対照として1%コレステロール含有食、普通食(CE-2)で6週間飼育した。6週目に小脳を摘出し、光学顕微鏡にて形態学的変化を調べた。1週間ごとに血清と小脳組織を採取し、HPLC法によりコレステロール、コレスタノール濃度の測定を行なった。2.正常ラット小脳顆粒細胞の初代培養を行った。正常な6-9日齢のWistar系ラット小脳をトリプシン処理により分離・播種し、37℃、5%CO_2インキュベータ-内で基本培地DMEMF12と10%FCSにて培養した。1日後、7.5%高コレステロール含有血清+2.5%FCS、7.5%高コレスタノール含有血清+2.5%FCS、7.5%普通食群ラットの血清+2.5%FCSに分けて培養を続けた。[結果]1.Wistar系ラットを異なる脂質含量の食餌で飼育したところ、1週間後より血清コレスタノール値はコレスタノール含有食群において他の2群に比べ0.01%水準で有意に増加していた。飼育6週間後のラット小脳組織内コレステロール値は3群間に有意差を認めなかったが、コレスタノール値はコレスタノール食群が他の2群に比べ0.01%水準で有意に増加していた。6週間後のラット小脳の光学顕微鏡による病理組織像においてHE染色では3群間での差は見られなかったが、ズダンブラックB染色では、コレスタノール食群ラット小脳のみにプルキンエ細胞に薄く黒く染まる脂肪滴が見られた。コレスタノール食の影響によりプルキンエ細胞への異常な脂質の蓄積が生じたと考えられる。2.ここで得られた高コレスタノール含有血清を用いて9日間培養した初代培養ラット小脳顆粒細胞内のコレスタノール値は、普通食群血清にて培養した細胞に比べ5%水準で有意に上昇していた。

脳 tendon yellow swollen disease の central god は 経 symptoms, central 経 に コ レ ス タ ノ ー ル が し, final に 経 god of cell death を led き up こ す た め と I 々 は exam え て い る. そ こ で こ の institutions を interpret す る た め に normal ラ ッ ト small 脳 granulosa cells に す seaborne る コ レ ス タ ノ ー ル の and え る cells handicap of sexual を adjustable べ た. [methods] 1. Department of Wistar ラ ッ ト オ ス 5 weeks 齢 を 1% コ レ ス タ ノ ー ル contain food, as と seaborne し て 1% コ レ ス テ ロ ー ル contain food, ordinary food (CE - 2) で 6 weeks between feeding and breeding し た. The 6-week に small 脳を extracted the <s:1> and optical 顕 micromirror にて morphological changes を modulated べた. 1 week between ご と に serum と small 脳 organization を take し, HPLC に よ り コ レ ス テ ロ ー ル, コ レ ス タ ノ ー ル concentration determination の を line な っ た. 2. Normal ラット small 脳 granulosa cells <s:1> primary culture を rows った. Department of normal な 6-9 齢 の Wistar ラ ッ ト small 脳 を ト リ プ シ ン 処 Richard に よ り separation seeding し, 37 ℃ and 5% CO_2 イ ン キ ュ ベ ー タ - で within basic petty DMEMF12 と 10% FCS に て cultivate し た. 1, 7.5% high コ レ ス テ ロ ー ル containing serum + 2.5% FCS, 7.5% high コ レ ス タ ノ ー ル containing serum + 2.5% FCS, 7.5% ordinary food group ラ ッ ト の serum + 2.5% FCS に points け て cultivate を 続 け た. [results] 1. Department of Wistar ラ ッ ト を different な る lipid content の continuous で rearing し た と こ ろ, 1 week after よ り serum コ レ ス タ ノ ー ル numerical は コ レ ス タ ノ ー ル containing food group に お い て he の 2 group of に than べ で intentionally に raised 0.01% level plus し て い た. Rearing six weeks after の ラ ッ ト small 脳 tissues コ レ ス テ ロ ー ル numerical は に between 3 group significant difference を recognize め な か っ た が, コ レ ス タ ノ ー ル numerical は コ レ ス タ ノ ー ル food group が he の 2 group に than べ で intentionally に raised 0.01% level plus し て い た. Small six weeks after の ラ ッ ト 脳 の optical 顕 micromirror に よ る histopathologic like に お い て HE dyeing で は で between three group of poor の は see ら れ な か っ た が, ズ ダ ン ブ ラ ッ ク B dyeing で は, コ レ ス タ ノ ー ル food group ラ ッ ト small 脳 の み に プ ル キ ン エ cells に thin く dyed black く ま る fat droplet が see ら れ た. コ レ ス タ ノ ー ル food の influence に よ り プ ル キ ン エ cells へ の abnormal accumulation of lipid の な が raw じ た と exam え ら れ る. 2. こ こ で have ら れ た high コ レ ス タ ノ ー ル containing serum を い て 9 day training し た original culture ラ ッ ト small 脳 granule cells の コ レ ス タ ノ ー ル numerical は, ordinary food group of serum に て cultivate し に た cells than べ 5% level で intentionally に し て い た.

项目成果

久保田俊一郎・脊山洋右: "CTXとコレステロール代謝" 現代医療. 28. 297-298 (1996)

Shunichiro Kubota 和 Yosuke Seyama：“CTX 和胆固醇代谢”现代医学 28. 297-298 (1996)。

脊山洋右: "フィトステロール血症" 現代医療. 28. 299-301 (1996)

Yosuke Seyama：“植物甾醇血症”现代医学 28. 299-301 (1996)。