权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

細胞相互間の認識機構に広範囲な影響を与えるmiDNA結合蛋白標的遺伝子の単純

一个简单的miDNA结合蛋白靶基因，对细胞间的识别机制具有广泛的影响

基本信息

批准号：
07273238
负责人：
野村慎太郎
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07273238/
关键词：
mi転写因子 c-kit 核移行シグナル c-fos サブトラクションマスト細胞

项目摘要

1.正常、あるいはmiミュータントのマスト細胞からRT-PCR法を用いてmRNAの3′サブトラクションcDNAライブラリーを作成し、両者の間で発現レベルの異なるcDNAを濃縮した。濃縮されたcDNAライブラリーのなかには癌遺伝子c-kit、あるいはマスト細胞特異的プロテアーゼ(MMCP-6)遺伝子のcDNAが見いだされた。これらに加えて、未知の遺伝子cDNAを取得し、その構造解析を行なった。現在これらの遺伝子の全構造の決定を行なっている。2.c-kit,MMCP-6遺伝子の制御領域の解析を行ない、5′-フランキング配列の中にmi転写因子と結合する部位を見いだした。3.マウスミュータントmiにおいてはmi遺伝子のDNAに結合する領域に-アミノ酸の欠失があることを明らかにしたc-kit,MMCP-6遺伝子の制御領域に変異を起こしたmi転写因子が結合できないことが示された。我々はさらにmi転写因子に対する特異的な抗体を作成し、この変異を起こしたmi転写因子が細胞核へ移行できなくなっていること、また変異mi転写因子が存在することによって正常mi転写因子が核に移行できなくなることを明らかにした。4.mi遺伝子産物と相互作用をする遺伝子産物の同定を試みた。mi遺伝子の塩基配列をもとに大腸菌に合成させた蛋白を抗原として抗mi蛋白抗体を取得し、マスト細胞核抽出液において抗mi蛋白抗体と反応する蛋白の同定を行い、mi転写因子とc-fos,TFEB,TFE3等の遺伝子産物が細胞内において結合しうることを示した。

1. Normal, reverse transcription, reverse transcription The cDNA of the concentrated cDNA of the tumor gene c-kit and the cell-specific cDNA of the MMCP-6 gene were found in the concentrated cDNA. The cDNA of the unknown gene was obtained and the structure was analyzed. Now, the decision of the whole structure of the genetic material is carried out. 2.c-kit,MMCP-6 gene control domain analysis, 5′-sequence analysis, 5′-sequence analysis, 5 3. DNA binding domain of MMCP-6 gene The expression of a miRNA gene in a cell nucleus is similar to that of a miRNA gene in a cell nucleus. 4. The interaction between molecular products and molecular products is studied. The expression of mi-protein in E. coli was determined by binding to mi-protein antigen and anti-mi-protein antibody. The expression of mi-protein gene, c-fos,TFEB and TFE3 was determined by binding to mi-protein antigen and anti-mi-protein antibody in cell nuclear extract.