マウスフレンド細胞における細胞分化脱癌化因子に関する研究

小鼠友细胞细胞分化及脱癌因子的研究

• 批准号: 61560084
• 负责人: 野村 慎太郎
• 金额: $ 0.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61560084/
• 关键词: 細胞分化; マウスフレンド細胞; 脱癌化

マウスフレンド細胞再分化誘導反応は2つの反応(DNA sideとmembraneside)の組み合わせで起こることを我々はすでに明らかにし、更にこれらの反応をになう蛋白性因子(DIF-【I】,DIF-【II】)の存在を明らかにした。本年度は各種分化誘導剤で処理した細胞抽出液よりこの両因子を精製することに成功し、かなり精製度のすすんだ標品を調製することができた。しかし、末端ペプチド分析をする純度には至っておらず、従ってこれらを抗原とし、抗体を作製することを行なった。このDIF-【I】、DIF-【II】は共にマウスの培養細胞より得たものであり、マウス、ラットに対しての抗原性は低く力価の高い抗体は得られなかったので、マウス膵臓細胞を用いた試験管内免疫法を確立しこれによりDIF-【I】、DIF-【II】に対するモノクローナル抗体を得ようとした。得られたハイブリドーマ466株のうち6株がDIF-【I】に対する中和活性を示し、又DIF-【II】に対しては2株が中和活性を示していた。しかし、これが果してDIF-【I】.DIF-【II】と特異的に反応する抗体を産生しているかどうかは更なる検討を要する。又、DIF-【I】について以下の実験事実が明らかとなったDIF-【I】をDNA topoisomerase【I】と共存させるとDNA topoisomerase【I】活性が上昇するということである。DNA topoisomerase【I】はTF【II】(transcriptionfactor【II】)と同一であるという報告も出されており、DIF-【I】が広範囲に存在すること(マウス肝臓、胎児、膵臓組織)と考えあわせると新たな遺伝子発現の場においての役割を示唆する生化学的な活性として注目されるものである。又組織特異的な存在を示すDIF-【II】はDIF-【I】存在下、新たにDIF-【III】と呼べる活性因子を生成する。このDIF-【III】は、他の2因子とカラムクロマト上での挙動が異なり、DIF-【I】、【II】の複合体が形成されたものと考えられ、現在、その点について検討中である。

Cell redifferentiation induces the formation of DNA side-to-side and membrane-to-side proteins (DIF-[I],DIF-[II]). This year, we successfully processed various differentiation inducers and purified the cell extract, and prepared the standard products. The purity of the protein is determined by the presence of an antigen or an antibody. DIF-[I] and DIF-[II] were used to establish the antibody-specific antibody in cultured cells by in vitro immunoassay. Of the 466 plants obtained, 6 plants showed neutralizing activity against DIF-[I], and 2 plants showed neutralizing activity against DIF-[II]. DIF-[I].DIF-[II]. Specific antibody production. In addition, DIF-[I] activity increases when DNA topoisomerase [I] activity increases. DNA topoimerase [I] and TF [II](transcription factor [II]) are the same as those reported in the report, DIF-[I] and exist in the field of new gene development. In the presence of tissue-specific factors, DIF-[II] and DIF-[I], new DIF-[III] activity factors are produced. DIF-[III] is opposite to, other 2 factors are different, DIF-[I],[II] complex is formed.

项目成果

Nomura,S.;Kamiya,T.;Oishi,M.: Experimental Cell Research. 163. 434-444 (1986)

Nomura，S.；Kamiya，T.；Oishi，M.：实验细胞研究。

Nomura,S.;Yamagoe,S.;Kamiya,T.;Oishi,M.: Cell. 44. 663-669 (1986)

野村，S.；山越，S.；神谷，T.；大石，M.：细胞。