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ゼブラフィッシュを用いた特異的シナプス形成機構の解析

利用斑马鱼分析特定突触形成机制

基本信息

批准号：
07278246
负责人：
東島眞一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

われわれは脊椎動物で最も単純な中枢神経系をもつ魚類(ゼブラフィッシュ)を用いて、神経回路網の構築過程において関与する新たな分子の同定、そしてその機能解析をめざしている。能瀬(基生研)らはショウジョウバエにおいて、少数の筋肉繊維で発現し、脊椎動物のF-Spondinと高い相同性をもつ遺伝子AN34を発見した。F-Spondinは、Floor plateで特異的に発現する分泌タンパク質で、in vitroにおいて神経繊維伸長を促進することが示されている。我々は、今回相同性が見い出された領域が、神経繊維誘導に基本的な役割を果たすためのドメインと期待し、ゼブラフィッシュから、このファミリーに属する遺伝子断片の単離を試みた。その結果、複数のクローン(約100bpの断片)を単離することができた。本年度計画では、これら遺伝子群の構造解析、発現様式の解析、そして予備計な異所発現実験を行った。(1)構造解析:このファミリーに属する4つの遺伝子予想遺伝子産物の全構造を決定した。うち2種はゼブラフィッシュのF-Spondinとみられる分子であり、ラットのF-Spondinとほぼ同様の構造を示す(F-Spondin1,F-Spondin2とする)。他の2つは互いに良く似ており、配列的にも、また、全構造的にもAN34により関連した分子であった(AN1,AN2とする)。(2)発現様式:4遺伝子すべてが、基本的にはfloor plateで発現していた。(3)異所発現:AN2にmycタグを導入して胚全体に発現させたところ、産物は基底膜に濃縮することがわかった。このことから、AN2は野性型の胚ではfloor plateの底の基底膜に濃縮して存在し、そこで何らかの機能を果たすことが示唆された。

われわれはvertebratesでmostも単正なcentral神経 series をもつ鱼(ゼブラフィッシュ)を用いて、神経The construction process of the circuit network is determined by the same relationship as the new molecules and the functional analysis of the new molecules is done. Nose (base life research) らはショウジョウバエにおいて, a small number of muscle 繊dimensional で発 appear し, spine Vertebrate animal のF-Spondin と高い Sameness をもつ伝子 AN34 を発见した. F-Spondin, Floor plate's specific に発appears and タンパク性で, in vitro において神経経経繊dimensional elongation promotion することが出されている. My 々は, this time's sameness が见い出された地が, 神経繊dimensional induced に Basic なservice cut を Fruit たすためのドメインとLooking forward to, ゼブラフィッシュから, このファミリーに belongs to する伝子 fragment の単leave and try みた.そのRESULT, plural のクローン (about 100bp fragment)を単里することができた. This year's plan includes structural analysis of the remaining subgroups, analysis of the 発appear様style, and preparation of plans for the current year. (1) Structural analysis: The complete structure of the product is determined by the structure of the このファミリーに 4つの伝子.うち2 kinds of はゼブラフィッシュのF-Spondinとみられるmolecule であり、ラットのF-Sp ondinとほぼ同様のstructuralをshowす(F-Spondin1,F-Spondin2とする). His の2つは mutually beneficial ており, arranged にも, また, and the whole structure にもAN34 によりrelated molecule であった (AN1, AN2 とする). (2) 発appear様style: 4缝子すべてが, basic にはfloor plate で発见していた. (3) Differentiation: AN2 myc is introduced into the whole embryo, and the product is condensed into the basement membrane. AN2 wild type embryo floor The basement membrane of the plate is concentrated and exists.