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ゼブラフィッシュを用いた特異的シナプス形成機構の解析

利用斑马鱼分析特定突触形成机制

基本信息

批准号：
07278246
负责人：
東島眞一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

われわれは脊椎動物で最も単純な中枢神経系をもつ魚類(ゼブラフィッシュ)を用いて、神経回路網の構築過程において関与する新たな分子の同定、そしてその機能解析をめざしている。能瀬(基生研)らはショウジョウバエにおいて、少数の筋肉繊維で発現し、脊椎動物のF-Spondinと高い相同性をもつ遺伝子AN34を発見した。F-Spondinは、Floor plateで特異的に発現する分泌タンパク質で、in vitroにおいて神経繊維伸長を促進することが示されている。我々は、今回相同性が見い出された領域が、神経繊維誘導に基本的な役割を果たすためのドメインと期待し、ゼブラフィッシュから、このファミリーに属する遺伝子断片の単離を試みた。その結果、複数のクローン(約100bpの断片)を単離することができた。本年度計画では、これら遺伝子群の構造解析、発現様式の解析、そして予備計な異所発現実験を行った。(1)構造解析:このファミリーに属する4つの遺伝子予想遺伝子産物の全構造を決定した。うち2種はゼブラフィッシュのF-Spondinとみられる分子であり、ラットのF-Spondinとほぼ同様の構造を示す(F-Spondin1,F-Spondin2とする)。他の2つは互いに良く似ており、配列的にも、また、全構造的にもAN34により関連した分子であった(AN1,AN2とする)。(2)発現様式:4遺伝子すべてが、基本的にはfloor plateで発現していた。(3)異所発現:AN2にmycタグを導入して胚全体に発現させたところ、産物は基底膜に濃縮することがわかった。このことから、AN2は野性型の胚ではfloor plateの底の基底膜に濃縮して存在し、そこで何らかの機能を果たすことが示唆された。

In vertebrate, the purest central nervous system, fish (fish), the process of constructing neural network, molecular identity, and functional analysis. The discovery of F-Spondin and high identity of vertebrate AN34. F-Spondin, Floor plate, specific secretion, in vitro, and promotion of nerve growth We are looking forward to seeing the same results in the field of neurobiology and neurobiology, and we are looking forward to seeing the same results in the field of neurobiology. The result is that the number of fragments (about 100bp fragments) is equal to the number of fragments. This year's plan is to analyze the structure of the original subgroup, analyze the occurrence pattern, and prepare for the occurrence of different phenomena. (1)Structural analysis: the total structure of the genetic product is determined by the genetic analysis. The structure of two kinds of F-Spondin is shown (F-Spondin1,F-Spondin2). He has 2 pairs of pairs (2)Expression:4. The basic expression is "floor plate". (3)The result is that AN2 myc is introduced into the basement membrane and the product is concentrated. The base membrane of the floor plate is concentrated and the function of the base membrane is displayed.