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遺伝学的に神経細胞の活動を変化させることによる、神経回路機能の解析

通过基因改变神经元活动来分析神经回路功能

基本信息

批准号：
18019049
负责人：
東島眞一
金额：
$ 3.58万
依托单位：
National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究課題では,ゼブラフィッシュの系を用いて,特定のクラスの神経細胞を不活化させることにより脊髄神経回路機能を解析することを目的としている。発現誘導系Creを用いて,Cre発現細胞で破傷風毒素を発現させるシステムを構築した。これを用いて,nkx2.2および,dbx1領域から由来する神経細胞群の役割を調べた。予備的な解析では,nkx2.2から由来するグルタミン酸作動性ニューロンを不活化すると,幼魚の行動性が著しく現象する,という表現型を得ている。電気生理学的な解析では,nkx2.2から由来するグルタミン酸作動性ニューロンは,運動時に脊髄全般の興奮性を高めることに関与することを示唆するデーターを得ており,得られた表現型と合致する。dbx1由来のグルタミン酸作動性ニューロンを不活化すると,幼魚の遅い遊泳行動が異常となる表現型を示した。これも,dbx1由来のグルタミン酸作動性ニューロンの電気生理学的解析と合致する。より特異性の高い発現誘導システムの構築を目指して,Creを2つにスプリットさせる系の構築も進めている。培養細胞レベルでポジティブな結果を与えるコンストラクトの作成にすでに成功しており,トランスジェニックフィッシュで系が動くかどうかをテストしている。系が構築されれば,2つのプロモーターの活性が重なる細胞群でターゲット遺伝子を発現させることが可能となり,非常に有効な系となることが期待される。

The purpose of this study is to analyze the function of spinal cord circuits by analyzing the activation of neurons in specific conditions. Cre was used to construct a system for the production of tetanus toxin in Cre cells. In this case, nkx2.2 and dbx1 domains are used to modulate the activity of the neuronal cell population. The analysis of the preparation shows that nkx2.2 is the origin of the acid activity of the fish, and the activity of the juvenile fish is the phenomenon of the phenotype. The analysis of electrical physiology shows that the expression pattern of the protein is related to the activity of the protein during exercise. dbx1 is an abnormal phenotype of juvenile fish swimming due to inactivation of its acid activity. The analysis and synthesis of dbx1 from the electrophysiological analysis of acid activation in the environment. The structure of the system is indicated by the specificity of the high level of induction, and the structure of the system is advanced. The results of the cultivation of cell culture were successful in the production of cell culture. 2. The activity of the cell population is very important for the development of the gene, which is very important for the system.