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遺伝学的に神経細胞の活動を変化させることによる、神経回路機能の解析

通过基因改变神经元活动来分析神经回路功能

基本信息

批准号：
18019049
负责人：
東島眞一
金额：
$ 3.58万
依托单位：
National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究課題では,ゼブラフィッシュの系を用いて,特定のクラスの神経細胞を不活化させることにより脊髄神経回路機能を解析することを目的としている。発現誘導系Creを用いて,Cre発現細胞で破傷風毒素を発現させるシステムを構築した。これを用いて,nkx2.2および,dbx1領域から由来する神経細胞群の役割を調べた。予備的な解析では,nkx2.2から由来するグルタミン酸作動性ニューロンを不活化すると,幼魚の行動性が著しく現象する,という表現型を得ている。電気生理学的な解析では,nkx2.2から由来するグルタミン酸作動性ニューロンは,運動時に脊髄全般の興奮性を高めることに関与することを示唆するデーターを得ており,得られた表現型と合致する。dbx1由来のグルタミン酸作動性ニューロンを不活化すると,幼魚の遅い遊泳行動が異常となる表現型を示した。これも,dbx1由来のグルタミン酸作動性ニューロンの電気生理学的解析と合致する。より特異性の高い発現誘導システムの構築を目指して,Creを2つにスプリットさせる系の構築も進めている。培養細胞レベルでポジティブな結果を与えるコンストラクトの作成にすでに成功しており,トランスジェニックフィッシュで系が動くかどうかをテストしている。系が構築されれば,2つのプロモーターの活性が重なる細胞群でターゲット遺伝子を発現させることが可能となり,非常に有効な系となることが期待される。

The subject of this research is the use of specific のクラスの神経 cells. Inactivation of the させることによりridge-髄神経circuit function and analysis of the することをpurpose としている. The inducible system of Cre is constructed with tetanus toxin and tetanus toxin in Cre inducing cells.これを Use いて, nkx2.2 および, dbx1 field から origin する神経 Cell Group のservice cut を Adjust べた. Prepared analysis of the origin of the nkx2.2 acid action of nkx2.2をInactivation すると, larvae のmobility がしくphenomenon する, というphenotype をget ている. The analysis of electrophysiology, the origin of nkx2.2, the acid action of nkx2.2, the movement of nkx2.2 The overall excitement level is high and the level is high and the level is high, and the level is high and the level is high. The origin of dbx1 is the inactivation of acid-activated ニューロンを and the abnormal swimming behavior of juvenile fish, and the phenotype of dbx1.これも, dbx1 origin of のグルタミン acid action ニューロンの电気physiological analysis and synthesis する. The high specificity of the よりりの高い発 appear to induce the システムのconstruct を目 Refers to して, Creを2 つにスプリットさせるSystem のconstruct も入めている. The result of cultured cell culture and cell culture was successful.しており,トランスジェニックフィッシュで行くかどうかをテストしている. The system is constructed and constructed, and the activity of the 2-cell group is maintained.伝子を発appears that it is possible and it is very effective.