転写因子の発現によって規定される神経細胞の、機能的神経回路網中での位置づけ

功能神经网络中神经元的定位由转录因子的表达决定

• 批准号: 16015322
• 负责人: 東島 眞一
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16015322/
• 关键词: ゼブラフィッシュ; トランスジェニック; 神経分化; 転写因子; GFP; 神経回路

Chx10,Vsx1,Dbx1,Evx2遺伝子について、相同組み換えの方法でGFPを組み込んだBACコンストラクトを作製した。トランジエントアッセイを行いGFPの発現を調べたところ、Vsx1,Chx10,Dbx1についてポジティブな結果が得られた。Vsx1::GFPとChx10::GFPでは、GFP陽性細胞はともに同側下行性介在ニューロンから成り立っていた。どちらもグルタミン酸作動性であり、よく似た形態をもつ。よって、Vsx1陽性細胞とChx10陽性細胞は同一の細胞集団であると考えられる。mRNAの発現は、Vsx1はventricular zoneの細胞で一過的に見られ、Chx10はpost mitoticニューロンで見られる。したがって、Chx10陽性細胞はVsx1陽性の細胞から由来することが強く示唆される。Vsx1::GFPトランスジェニックフィッシュ(ゲノムに挿入されているもの)は作製済みであり、作製中のChx10::GFPトランスジェニックフィッシュと併せて、Vsx1/Chx10陽性ニューロンの回路中での役割を、電気生理学的な解析により調べる予定である。遊泳行動中に、同側の運動ニューロンの活動を直接制御する、いわゆるCPG(central pattern generator)ニューロンではないかと推測している。Dbx1::GFPのトランジエントアッセイでは、交叉型介在ニューロンがGFPでラベルされた。GFP陽性ニューロンはグルタミン酸作動性ニューロンとグリシン作動性ニューロンの双方を含み、予備的な解析では、Evx2遺伝子が、これらのうちグルタミン酸作動性ニューロンのみを特異的にマークするという結果を得ている。Evx2がDbx1陽性細胞から由来する細胞に関して、神経伝達物質の決定因子になっているかを調べる予定である。また、作製中のDbx1::GFPトランスジェニックフィッシュの作製後は、GFPを発現する細胞の、回路中での機能を電気生理学的に調べる予定である。興奮性と抑制性のニューロンが存在するが、抑制性ニューロンに関しては、体の動きの相反性抑制を制御するニューロンだと推測している。

Chx10 Vsx1, Dbx1, Evx2 heritage 伝 son に つ い て change, the same group み え の way で GFP を group み 込 ん だ BAC コ ン ス ト ラ ク ト を cropping し た. ト ラ ン ジ エ ン ト ア ッ セ イ を line い GFP の 発 now を adjustable べ た と こ ろ, Vsx1, Chx10, Dbx1 に つ い て ポ ジ テ ィ ブ な results ら が れ た. Vsx1: : GFP と Chx10: : GFP で は, GFP positive cells は と も に ipsilateral downward interface in ニ ュ ー ロ ン か ら into り made っ て い た. <s:1> ちら グ グ であ タ タ タ タ タ タ グ acid-active であ, よく similar to た form を グ グ. Youdaoplaceholder0, VSx1-positive cells と, chx10-positive cells in the same <s:1> cell group であると study えられる. mRNA <s:1> presence, で passing through Vsx1 <s:1> ventricular zone <s:1> cells に see られ, Chx10 <s:1> post mitoticニュ ロ ロ ロ で で Youdaoplaceholder0 たがって, Chx10 positive cells vsx1-positive <s:1> cells ら ら origin する とが とが strong く hint される. Vsx1: : GFP ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク フ ィ ッ シ ュ (ゲ ノ ム に scions into さ れ て い る も の) は cropping 済 み で あ り, cropping の Chx10: : GFP ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク フ ィ ッ シ ュ と and せ て, Vsx1 / Chx10 positive ニ ュ ー ロ ン の loop で の "を cut, electric 気 physiology な parsing に よ り adjustable Youdaoplaceholder0 set である. Swimming in に, ipsilateral の ニ ュ ー ロ ン の activity を direct suppression す る, い わ ゆ る CPG (central pattern generator) ニ ュ ー ロ ン で は な い か と speculation し て い る. Dbx1: : GFP の ト ラ ン ジ エ ン ト ア ッ セ イ で は, cross type interfaces in ニ ュ ー ロ ン が GFP で ラ ベ ル さ れ た. GFP positive ニ ュ ー ロ ン は グ ル タ ミ ン acid actuation sex ニ ュ ー ロ ン と グ リ シ ン actuation sex ニ ュ ー ロ ン の を み, both sides to prepare な parsing で は, Evx2 heritage 伝 が, こ れ ら の う ち グ ル タ ミ ン acid actuation sex ニ ュ ー ロ ン の み を specific に マ ー ク す る と い う results て を い る. Evx2 が Dbx1 positive cells か ら origin す る cells に masato し て, god 経 伝 の decision factor of material に な っ て い る か を adjustable べ る designated で あ る. ま た, cropping の Dbx1: : GFP ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク フ ィ ッ シ ュ の は after cropping, GFP を 発 now す る cell の, loop で の function を electric 気 physiology に adjustable べ る designated で あ る. Excitatory と inhibitory の ニ ュ ー ロ ン が exist す る が, inhibitory ニ ュ ー ロ ン に masato し て は, body dynamic き の の instead inhibition を suppression す る ニ ュ ー ロ ン だ と speculation し て い る.