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ゼブラフィッシュ脊髄神経細胞多様性形成機構の包括的解析

斑马鱼脊髓神经元多样性形成机制的综合分析

基本信息

批准号：
17017043
负责人：
東島眞一
金额：
$ 3.2万
依托单位：
National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、ゼブラフィッシュを用いて、脊髄神経細胞多様性形成の包括的な理解を目指すものである。研究方針は、(1)発生期に神経系の少数の細胞で発現する転写因子に関して、その陽牲細胞をトランスジェニックフィッシュの手法でGFPおよびDsRedで可視化し、(2)GFP陽性細胞がどのような神経細胞に分化していくかを形態学的に調べ、つぎに、色の異なったライン同士の掛け合わせにより、2つの異なった遺伝子に関して陽性細胞同士の関係を調べる、である。実際には、Chx10,Vsx1,nkx2.1,Lim1,Lim5,BarH1,Dbx1,gsh1,gata3,Sim1b,Evx2,atoh1a,pax6aについて解析を進めた。すべての遺伝子に関して、まず、BACにGFPを挿入したコンストラクトを作製した。そのうち、Evx2,Sim1b以外のものに関しては、期待される細胞群にGFPの発現が見られた。これらポジティブなものに関して、トランスジェニックフィッシュの作製を行い、Vsx1,Chx10,BarH1,Dbx1に関してはGFPトランスジェニックラインが得られた。また、Chx10に関してはDsRedラインも得られた。また、神経伝達物質に関する遺伝子に関してもトランスジェニックフィッシュの作製を進め、glyt2(グリシン作動性ニューロンで発現)、vglut2a(グルタミン酸作動性ニューロンで発現)についてトランスジェニックフィッシュが得られた。得られたラインのうち、詳しい解析はChx10を中心に行った。その結果、Chx100陽性細胞はすべて同側下行性神経細胞であり、またグルタミン酸作動性の興奮性神経細胞であることを明らかにした。他の転写因子との関係ではChx10陽性細胞はすべてVsx1陽性細胞に含まれることが明らかとなった。

This study aims to provide insights into the application of neurogenesis, including the development of neuronal diversity. The research policy includes: (1) visualization of GFP and DsRed in the development of a small number of cells in the neuronal system;(2) morphological modulation, differentiation, and color differentiation of GFP positive cells; 2. The relationship between positive cells and their relatives is regulated. In fact, Chx10, Vsx1, nkx2.1, Lim1, Lim5, BarH1, Dbx1, gsh1, gata3, Sim1b, Evx2, atoh1a, pax6a are analyzed. For example, if you want to control the transmission of GFP, you can control it. The expression of GFP in cell populations other than Evx2 and Sim1b was observed. Vsx1, Chx10, BarH1, Dbx1 are related to GFP, and Vsx1,Chx10,BarH1,Dbx1 are related to GFP. Chx10 is the best choice. In addition, the gene related to the neurotransmitter substance is related to the progress of the operation, glyt2 (the occurrence of the activity of the neurotransmitter), vglut2a (the occurrence of the activity of the neurotransmitter). Get the details of Chx10 in the center of the line Chx100-positive cells were found to be ipsilateral descending neurocytes and acid-activated neurocytes. The relationship between Chx10-positive cells and Vsx1-positive cells was discussed.