生殖腺の形成及び性分化に伴う遺伝子発現カスケードとAd4BPの発現と機能

与性腺形成和性分化相关的基因表达级联以及 Ad4BP 的表达和功能

• 批准号: 07283217
• 负责人: 諸橋 憲一郎
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07283217/
• 关键词: 副腎皮質; 精巣; 卵巣; ステロイドホルモン; Ad4BP; 転写因子; ノックアウトマウス

本研究では、Ad4BPがステロイドホルモン産生組織の分化過程でいかなる機能を有するかを調べることを目的とした。まず1、胎仔期より成獣にいたるラットの生殖腺におけるAd4BPの発現を検討した。(1)Ad4BPは生殖腺の性分化が認められる以前の生殖隆起に既に発現しており、その発現量に性差は認められなかった。(2)生殖腺の性分化の進行と共に、精巣で高く卵巣で低い発現が認められる。この性依存的発現は、生後1週から3週にかけて雌での発現が亢進することで消失する。(3)副腎皮質における発現も、この組織が腹腔内に現われる以前に認められ、高い発現が成獣まで続く。副腎における発現には、性に依存した発現量の差は認められない。(4)脳下垂体ゴナドトロプ、視圧下部腹内側核においても発現が認められた。これらの細胞には胎性期にAd4BPの発現が認められ、特に視床下部腹内側核の原基となる細胞集団が同定された。2、次に、Ad4BP遺伝子のノックアウトマウスの解析より以下の結果を得た。(1)Ad4BP遺伝子の破壊により、これらマウスは生後1週前後に死ぬ。(2)ノックアウトマウスには、副腎と性腺が認められず外性器は雌方を示した。(3)脳下垂体ゴナドトロプの減少と、ゴナドトロプにおけるLH/FSHの著しい発現低下が認められた。(4)視床下部腹内側核における神経細胞の減少は認められなかったが、腹内側核としての形態を有していなかった。3、更に、Ad4BP遺伝子の転写調節機構の解析を行った。(1)本遺伝子には複数の第一エクソンが存在したが、これらのエクソンの使用頻度は組織や時期で差は認められなかった。(2)本遺伝子の転写は、第一エクソン上流に存在するE-boxと第一イントロンに存在するAd4配列により調節される。(3)E-box結合タンパク質はAd4BPの発現と類似したパターンをとる。(4)胎性期及び新生児期の精巣から調製されたcDNAライブラリーより、E-box結合タンパク質の一種が単離された。

This study で は, Ad4BP が ス テ ロ イ ド ホ ル モ ン tissue の differentiation で い か な る function を have す る か を adjustable べ る こ と を purpose と し た. Youdaoplaceholder0 1. During the fetal period, よ よ forms 獣に たるラット たるラット <s:1> gonadal gland におけるAd4BP を検 occurrence を検 attack た. (1) Ad4BP は gonad の sexual differentiation が recognize め ら れ る の reproductive uplift に before both に 発 now し て お り, そ の 発 quantity poor に は now recognize め ら れ な か っ た. (2) Gonadal <s:1> sexual differentiation <e:1> undergoes と co-に, spermatic nests で are high く, and oocyte nests で are low と, resulting in が identity められる. The occurrence of <s:1> sexual dependence する, 1 week after birth ら, 3 weeks after に けて female で <s:1> occurrence が hyperactivity する とで disappearance する. (3) In the adrenal cortex, における is present; in the <s:1> and <s:1> <s:1> tissues, が is present; in the abdominal cavity, に is present; われる is present; previously, に is present; められ is present; が is present; 獣まで続く is present. The accessory kidneys における develop に, sexual に dependence た development amount <s:1> difference <s:1> tolerance められな められな. (4) The 脳 pituitary gland ゴナドトロプ and the inferior ventromedial nucleus of the optic pressure にお 脳 て て が present が and められた. こ れ ら の cells に は fetal period に Ad4BP の 発 が now recognize め ら れ ventromedial nucleus, especially に bed bottom の primordium と な る cells sets 団 が with fixed さ れ た. 2. Next に, Ad4BP remains 伝 sub-<s:1> ノッ アウト アウト ウス ウス solving よ the result of the following sub-を gives た. (1)Ad4BP 's 伝 offspring are broken through 壊によ and <s:1> れら ウス ウス に die に about one week after birth. (2)ノッ た アウト ウスに ウスに, adrenal と gonads が recognize められず exophytes を the female side を shows た た. (3) The 脳 pituitary gland ゴナドトロプ <s:1> decreases と, ゴナドトロプにおけるLH/FSH <s:1> shows a decrease in <s:1> and められた. The ventromedial nucleus (4) the bed bottom に お け る の reduce は 経 cells recognize god め ら れ な か っ た が, ventromedial nucleus と し て の form を have し て い な か っ た. 3. For に and Ad4BP, write the 伝 sub-伝 転 for the regulating mechanism を and the analysis on the を line った. (1) the posthumous son 伝 に は plural の first エ ク ソ ン が exist し た が, こ れ ら の エ ク ソ ン の use frequency は organize poor で は や period to recognize め ら れ な か っ た. (2) the posthumous son 伝 の planning write は, first エ ク ソ ン upper に exist す る E - box と first イ ン ト ロ ン に exist す る Ad4 match column に よ り adjust さ れ る. (3) The E-box combines with the タ, パ, パ and <s:1> Ad4BP of the <s:1> mass, presenting a と similar appearance to the <s:1> たパタ, <s:1>, <s:1>, and をとる. (4) the fetal period and び where new period の fine 巣 か ら modulation さ れ た cDNA ラ イ ブ ラ リ ー よ り, E - box combining タ ン パ ク qualitative の a が 単 from さ れ た.

项目成果

Koh Shinoda: "Developmental defects of the ventromedial hypothalamic mucleus and pituitary gonadotroph in the Ftz-Fl disrupted mice." Develop. Dynam.204. 22-29 (1995)

Koh Shinoda：“Ftz-Fl 破坏小鼠腹内侧下丘脑粘液和垂体促性腺激素的发育缺陷。”

Hironobu Sasano: "Ad4BP in the human adrenal cortex ahd its disorders." J. Clin. Endocrinol. Metab.80. 2378-2380 (1995)

Hironobu Sasano：“人类肾上腺皮质中的 Ad4BP 及其紊乱。”

Masatoshi Nomura: "An E box element is required for the expression of the ad4bp gene, a mamalian homologue of ftz-fl gene,witch is essential for adrenal and gonadal development." J. Biol. Chem.270. 7453-7461 (1995)

Masatoshi Nomura：“ad4bp 基因（ftz-fl 基因的哺乳动物同源物）的表达需要 E 盒元件，它对于肾上腺和性腺的发育至关重要。”

Ken-ichirou Morohashi: "Functional difference between Ad4BP and ELP, and their distributions in steroidogenic tissues." Mol. Endocrinol.8. 643-653 (1994)

Ken-ichirou Morohashi：“Ad4BP 和 ELP 之间的功能差异，以及它们在类固醇生成组织中的分布。”

Kazuto Takayama: "Immunohistochemical localization of Ad4-binding protein with correlation to steroidogenic enzyme expression in cycling human ovaries and sex cord stromal tumors" J. Clin. Endocrinol. Metab.80. 2815-2821 (1995)

Kazuto Takayama：“Ad4 结合蛋白的免疫组织化学定位与循环人类卵巢和性索间质瘤中类固醇生成酶表达的相关性”J. Clin。