心筋細胞におけるPAF受容体機能の解析

心肌细胞PAF受体功能分析

• 批准号: 08258206
• 负责人: 和泉 孝志
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08258206/
• 关键词: PAF受容体; トランスジェニックマウス; ノックアウトマウス; エンドトキシンショック

生理活性脂質である血小板活性化因子(PAF)はアレルギー反応、免疫反応などの主要なメディエーターであり、脳、心、肺、腎などにおいて生理学機能を修飾する因子としても作用している。心臓はPAFを産生し代謝する能力を有し、摘出心や心筋細胞をPAFで刺激すると受容体を介して血圧低下や徐脈などの作用が表れるが、PAFの果たす役割や、その情報伝達系の分子的メカニズムはほとんど解明されていない。ラットの心筋初代培養細胞にPAFを作用させると一過性のカルシウム上昇反応を認め、この反応は受容体拮抗剤により完全に阻害された。また、この細胞系においてPAF刺激はc-fos、c-mycなどの初期応答遺伝子の誘導をもたらした。PAF受容体を心臓に過剰発現したトランスジェニックマウスでは、PAFの静注によって、血圧低下、徐脈などのため数分以内に死亡した。さらに、このマウスはエンドトキシンに対する感受性も増加していた。野生型マウスでは10匹中1匹が死亡したのみであるが、トランスジェニックマウスでは3分の2が3日以内に死亡した。マウス血小板にはPAF受容体は存在せずトランスジェニックマウスにも存在しないため血栓以外の原因が考えられるが死因はまだ明らかになっていない。現在、PAF受容体を欠損したマウスを作製し解析を進めているところである。このマウスはPAFの静注に対して血圧低下などの反応を示さず、またその腹腔内白血球はPAFに対するカルシウム上昇の応答性を欠除しており本受容体の欠損が確認された。今後、さらに初代心筋培養細胞のPAFによるシグナルの解析、PAF受容体高発現トランスジェニックマウスおよびノックアウトマウスの表現型の解析を押し進めていき、心筋細胞におけるPAF受容体の機能を解明する予定である。

Platelet-activating factor (PAF), a physiologically active lipid, plays an important role in modifying physiological functions of the heart, lungs and kidneys, as well as in immune responses. The ability to produce PAF and metabolize PAF, extract PAF from cardiac muscle cells, stimulate PAF from receptors, mediate low blood pressure, and regulate the function of PAF. The PAF effect on primary cultured cardiac muscle cells was blocked by a transient increase in PAF receptor antagonist. PAF stimulates the induction of c-fos, c-myc, and early response genes in these cell lines. PAF receptor heart failure occurs within minutes of PAF intravenous infusion, low blood pressure, and low blood pressure. In addition to the above, it is possible to increase the sensitivity of the skin. 1 out of 10 wild-type animals died within 2 to 3 days Platelet PAF receptor is not present, but causes other than thrombus are present. Now, PAF receptor is in short supply. The intravenous injection of PAF is responsible for the decrease of blood pressure, and the increase of PAF in the abdominal cavity is responsible for the decrease of blood pressure. In the future, the analysis of PAF receptor profile in primary cultured cardiac muscle cells, the analysis of PAF receptor expression profile, and the analysis of PAF receptor function in cardiac muscle cells will be discussed.

项目成果

T.Yokomizo,et al.: "cDNA cloning,expression,and mutagenesis study of leukotriene B_412-hydoxydehydrogenase." J.Biol.Chem.271. 2844-2850 (1996)

T.Yokomizo,et al.：“白三烯 B_412-羟基脱氢酶的 cDNA 克隆、表达和诱变研究。”

S.Ishii,et al.: "Bronchial hyperreacitivity,increased endotoxin lethality and melanocytic tumorigenesis in transgenic mice overexpressing platelet-activating factor receptor." EMBO J.16. 133-142 (1997)

S.Ishii 等人：“过度表达血小板激活因子受体的转基因小鼠中的支气管高反应性、内毒素致死率增加和黑素细胞肿瘤发生。”

I.Ishii,et al.: "Alanine exchanges of polar amino acids in the transmembrane domains of a platelet-activating factor receptor generate both constitutively active and inactive mutants." J.Biol.Chem.(in press). (1997)

I.Ishii 等人：“血小板激活因子受体跨膜域中极性氨基酸的丙氨酸交换产生组成型活性和非活性突变体。”

S.Ishii,et al.: "A murine platelet-activating factor receptor gene:cloning,chromosomal localization and up-regulation of expression by lipopolysaccharide in peritoneal resident macrophages." Biochem.J.314. 671-678 (1996)

S.Ishii 等人：“鼠血小板激活因子受体基因：克隆、染色体定位以及腹膜驻留巨噬细胞中脂多糖表达的上调。”