トランスジェニックマウスを用いた心筋細胞におけるPAF受容体の解析

使用转基因小鼠分析心肌细胞中的 PAF 受体

• 批准号: 06274207
• 负责人: 和泉 孝志
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06274207/
• 关键词: 血小板活性化因子; 受容体; 心筋細胞; 遺伝子発現; トランスジェニックマウス

PAF受容体遺伝子は2種類の異なったプロモーターによって転写調節を受けており、2つの異なったタイプ(すなわち白血球タイプと心筋タイプ)の2種類のmRNAを産生する。このうち心筋タイプのmRNAのプロモーター領域にはERE(estrogen resposible element)、TIE(TGF-βinhibitory element)、RARE(retinoic acid responsuble element)が存在することがわかっている。このプロモタ-の機能を調べる目的で、CAT遺伝子を結合したコントラクトを作製し解析を行った。その結果、エストロゲンによる転写活性の促進、ならびにTGF-βによる抑制を認めた。現在までPAF受容体を過剰発現したトランスジェニックマウスの作製に成功しており、そのうちの一系統では、心臓、骨格筋において特に発現量が多かった。現在このトランスジェニックマウスの表現型の解析を行っているところである。このマウスにおいては体重が対称群に比べて約20%低下しており、雌からはトランスジーンが子孫に伝わりにくいなどの特徴が認められた。通常マウスではほとんど変化の見られない量のPAFを静注すると、高発現系統マウスにおいては収縮期血圧の低下、徐脈、房室ブロック、QT時間の延長がみられ、数分以内に死亡した。さらに、PAFに対する異常な気道内圧の上昇が認められた。現在、このトランスジェニックマウスの子孫を増やしているところである。今後、心筋初代培養細胞系を確立して、心筋細胞におけるPAF刺激による細胞内情報伝達機構(イノシトールリン脂質回転、アラキドン酸遊離、cAMP産生抑制、MAPキナーゼ活性化など)の測定を行う予定である。さらに、心筋細胞におけるPAF刺激を介する細胞内情報伝達機構およびプロトオンコジーンの動きを調べ、PAF刺激が心筋肥大や形質変化に与える影響を検討する。

PAF receptor gene expression is regulated by 2 different types of mRNA, and 2 different types of mRNA are produced. The domain of the mRNA of this gene is ERE(estrogen responsible element), TIE(TGF-βinhibitory element) and RARE(retinoic acid responsive element). The function of the computer is to adjust the purpose of the computer, and the CAT information is to combine the functions of the computer with the analysis of the computer. The results showed that TGF-β activity was promoted and TGF-β activity was inhibited. Now, the PAF receptor has been successfully realized in the production of itransj, and a system of itransjhas been successfully realized in a large amount. Now, the phenotype analysis of the virus is in progress. The weight of the female is about 20% lower than that of the male. Usually, the amount of PAF is injected intravenously, and the system is high. The blood pressure is low during contraction, and the pulse is slow. The QT time is prolonged. The patient dies within a few minutes. The abnormal internal pressure rise of PAF and PAF is recognized. Now, we're going to have to go through this. In the future, the establishment of primary culture cell lines of cardiac muscle and the determination of intracellular information transmission mechanisms (lipid metabolism, acid dissociation, cAMP production inhibition, MAP activation) under PAF stimulation in cardiac muscle cells will be determined. To investigate the effects of PAF stimulation on intracellular information transmission mechanisms and the regulation of cardiac muscle motility, cardiac muscle hypertrophy and morphological changes.