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キャピラリーアレイ電気泳動によるがんの高性能遺伝子診断システムの開発

利用毛细管阵列电泳开发高性能癌症基因诊断系统

基本信息

批准号：
08266265
负责人：
馬場嘉信
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kobe Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究においては、CE-LIFとF-SSCPの有機的結合によるがんの高性能遺伝子診断システムを完成させるために以下の研究を進めた。また、キャピラリーアレイ電気泳動(CAE)開発に必要な新規ゲルの開発を行った。さらに、CAEのマイクロチップ化に関する基礎的検討を行った。1.がん関連遺伝子について、既に開発したCE-LIFシステムを用いてSSCPを解析し、正確、迅速に遺伝子診断が出来ることを明らかにした。変異の検出感度を従来法と比較したところ、10倍以上の感度で検出できることが明らかとなった。また、解析に要する時間は、100塩基程度のDNAで10分、300塩基程度のDNAでは20分であった。以上の検討によりCE-LIFとF-SSCPを結合し、CE-LIFの迅速さ、高感度さとF-SSCPの簡便さを兼ね添えたがんの高性能遺伝子診断システムを開発した。2.キャピラリーアレイ電気泳動(CAE)を開発するために、新たに、熱可逆性ゲルである数種の新規ゲルを開発した。このゲルは、室温ではSSCP解析を行い、ゲルの温度を上昇させるとキャピラリーから押し出し新たなゲルと交換できる。従つて、この新規ゲルを用いれば、ゲル充填キャピラリーを大量に調整することなく、測定毎にゲルを交換するだけで、高精度なSSCP解析を行うことができる。3.CAEシステムをマイクロチップ化することにより、更なる高速化と高精度化が期待されるので、そのために、マイクロチップ化CE装置を試作し、500塩基対程度のDANを3分以内に解析できることを明らかにした。これらの成果は、がんの遺伝子診断を高速化・高精度化する上で重要な貢献をなすものである。以上の研究成果を基礎に、今後は、さらに、マイクロチップ化CAEシステムを開発し、多数のがん関連遺伝子の多型を同時に検出できるがんの超高速遺伝子診断システムを確立するための検討を行う。

This study aims to develop a new approach to high-performance gene diagnosis by combining CE-LIF and F-SSCP. New regulations are necessary for the development of electromobility (CAE). The basic research on CAE is carried out. 1. To analyze SSCP correctly and quickly, and to diagnose related genes clearly. The sensitivity of the difference is different from that of the comparison, and the sensitivity of more than 10 times is different from that of the comparison. The analysis time is 10 minutes for DNA at 100 bases and 20 minutes for DNA at 300 bases. CE-LIF and F-SSCP are integrated into each other, CE-LIF is rapid, F-SSCP is highly sensitive, and F-SSCP is simple. 2. The development of several new regulations on electromobility (CAE) The temperature of the SSCP is increased, and the temperature of the SSCP is increased. For example, the new rules must be used to fill in a large number of adjustments. For example, the new rules must be used to measure each item. For example, the new rules must be used to analyze SSCP with high precision. 3. CAE system is expected to be faster and more accurate, and the DAN of the 500-degree system is expected to be analyzed within 3 minutes. The results of this study are important for speeding up and improving the accuracy of genetic diagnosis. The above research results are the basis for future research and development of CAE systems, simultaneous detection of multiple types of most related genes, and establishment of ultra-high-speed gene diagnosis systems.