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希土類錯体の蛍光特性を利用したキャピラリー電気泳動によるDNAの遺伝情報解析

利用稀土配合物的荧光特性通过毛细管电泳分析 DNA 的遗传信息

基本信息

批准号：
07230294
负责人：
馬場嘉信
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Kobe Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、遺伝情報解析に適した希土類錯体を用いたDNAラベル化剤の開発、ヒトをはじめとした様々な生物種の遺伝子のPCRによる増幅条件の検討、キャピラリー電気泳動用蛍光検出システムの開発・設計を行った。1.希土類金属を用いて様々な錯体を合成し、その蛍光スペクトルおよび蛍光強度を測定した。その際には、希土類元素としてランタニドのEu(III), Tb(III), Sm(III), Dy(III)を選び、数種のキレート剤を選択し、これらの錯体の蛍光スペクトルを測定した。その結果から、これらのものは、全てDNAの遺伝情報解析に適した蛍光特性を有する希土類錯体であることを明らかにした。2.ヒト・酵母・線虫のゲノムから取り出した遺伝子の塩基配列をキャピラリー電気泳動により決定するために、シークエンシング反応の最適化を行った。その結果、ヒトをはじめとした様々な生物種の遺伝子配列をキャピラリー電気泳動を用いて最も正確に決定できる条件を確立した。3.この結果および希土類錯体の蛍光スペクトルのデータから、希土類錯体を蛍光ラベル化剤として遺伝子配列を決定する際に必要なキセノンランプを用いた蛍光検出装置の設計・開発を行った。この装置は、希土類錯体の蛍光特性に合致した励起波長を選択可能で、4種の蛍光ラベル化剤から発する波長の異なる蛍光を同時に検出できるものである。これらは、希土類錯体による高感度ラベル化法とキャピラリー電気泳動を結合した高性能遺伝情報解析システムを開発するための基礎的でかつ重要な成果である。今後は、希土類錯体の蛍光特性に合致したレーザー蛍光検出システムとキャピラリー電気泳動を結合したシステムを開発し、希土類錯体で蛍光ラベル化したDNAの遺伝情報解析のための最適条件の検討を行う。

In this study, we investigated the development and design of PCR amplification conditions for DNA sequence analysis and DNA sequence analysis in biological species. 1. Rare earth metals are used in the synthesis of complex substances, and the determination of light intensity. In addition, rare earth elements such as Eu(III), Tb (III), Sm (III), Dy (III) are selected from the group consisting of Eu (III), Tb (III), Sm(III), Dy(III), Eu (III), Tb (III), Sm (III), Dy (III), Eu (III), Sm (III), Sm The result is that the DNA sequence analysis is suitable for the detection of light characteristics. 2. The optimization of the molecular structure of the yeast and worm is determined by the molecular structure of the yeast and worm. As a result, the genetic distribution of biological species is determined by the most accurate conditions. 3. The results show that the design and development of optical detection devices for rare earth type faults are necessary when determining the optical distribution of rare earth type faults. The device is capable of selecting excitation wavelengths based on the combination of the excitation characteristics of rare earth and rare earth, and simultaneously detecting the excitation wavelengths of four different excitation wavelengths based on the combination of excitation wavelengths and rare earth. This is the first time that a high-sensitivity chemical method has been developed for high-performance information analysis. In the future, we will explore the optimal conditions for the analysis of DNA genetic information in rare earth-like faults by combining optical characteristics with electrical mobility.