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マイクロチップ化キャピラリー電気泳動によるがんの高性能遺伝子診断システムの開発

利用微芯片毛细管电泳开发高性能癌症基因诊断系统

基本信息

批准号：
09255259
负责人：
馬場嘉信
金额：
$ 1.66万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09255259/
关键词：
キャピラリー電気泳動マイクロチップ SSCP PCR がん遺伝子診断

项目摘要

昨年度までに行ってきた、キャピラリーアレイ電気泳動-レーザー蛍光検出装置(CAE-LIF)およびF-SSCP法を有機的に結合したがんの遺伝子診断システムの開発に成功したので、本研究においては、研究をさらに発展させるために、マイクロチップ化したキャピラリー電気泳動によるがんの超高性能遺伝子診断システムの開発を目的として、以下の研究を行った。1.単一のマイクロチャンネルを有するマイクロチップを作製し、マイクロチップ用の高電圧印加装置およびレーザー誘起蛍光検出装置を開発した。この装置を用いた、DNAの高速解析法を確立するために、マイクロチャンネル中にDNA解析用の分離担体を満たし、種々の条件下で電気泳動を行なった。その結果、1000塩基までのDNAをわずか、1分間で解析できることを明らかにした。この装置の開発と解析条件の検討によりマイクロチップ化キャピラリー電気泳動を開発した。2.さらに、マイクロチップ化キャピラリー電気泳動(MC-CE)とF-SSCPの有機的結合によるがんの高性能遺伝子診断システムの開発のための基礎的検討を行った。このシステムを用いた場合の、がん関連遺伝子の変異および多型を検出するための最適条件を調べた結果、300塩基までの1本鎖DNAをわずか、5分程度で解析できることを明らかにした。これらの成果は、がんの遺伝子診断を高速化・高精度化する上で重要な貢献をなすものである。以上の研究成果を基礎に、今後は、さらに、複数のマイクロチャンネル中を泳動するDNAを同時に検出できるマイクロチップ化キャピラリーアレイ電気泳動システムを開発し、多数のがん関連遺伝子の多型を同時に検出できるがんの超高速遺伝子診断システムを確立するための検討を行う。

In the past year, CAE-LIF and F-SSCP methods were organically combined to successfully develop the gene diagnosis system. In this study, CAE-LIF and F-SSCP methods were used to develop the gene diagnosis system with ultra-high performance. The following research is conducted. 1. High voltage detection device for high voltage detection and light detection device for high voltage detection The device was used to establish a high-speed DNA analysis method. The results, 1000 bases of DNA, 1 minute resolution, 1000 bases of DNA. The development and analysis conditions of the device are discussed in detail. 2. The organic combination of MC-CE and F-SSCP for the development of high-performance gene diagnosis systems is discussed. In this case, the most suitable conditions for the analysis of DNA sequences are: 300 bp; 5 bp; The results of this study are important for speeding up and improving the accuracy of genetic diagnosis. The above research results provide a basis for the future development of simultaneous detection of DNA in multiple DNA sequences, simultaneous detection of polymorphisms of most associated DNA sequences, and establishment of ultra-high-speed DNA diagnostic systems.