発生工学を応用したα-フェトプロティンの糖鎖構造および機能の解析

利用发育工程分析甲胎蛋白的糖链结构和功能

• 批准号: 08266201
• 负责人: 西 信三
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08266201/
• 关键词: 発生工学; α-フェトプロテイン; 糖鎖; 実験的甲状腺炎; がん性変化; 免疫抑制活性; レクチン; トランスジェニックマウス

1.AFP糖鎖の組織特異性およびがん性変化の解析C_<57>BL_6マウスよりヒトAFP cDNAおよびβ-actin promoter/enhancerを用いて作製したヒトAFPを恒常的に産生するトランスジェニックマウス(TG-3)の種々の組織細胞を培養し、培養上清中のAFPのアイソフォームを4種類の異なるレクチンを用いるレクチンアフィニティー電気泳動で解析した。ConA、LCA、E-PHA、およびallo Aの4種類レクチンを用いた電気泳動で、肝臓、脾臓、脳、腎臓、肺、心臓由来のAFPにそれぞれ数種類のアイソフォームが確認され、組織により微細に糖鎖構造が違うことが明らかになった。肺がんでは、AFPの糖鎖にフコース残基が付加されることによるがん特異的なphenotypeの変化が確認された。2.実験的甲状腺炎モデルを用いたAFPの免疫抑制作用の解析TG-3マウスおよび対照マウスの足踵および下腿皮下に、精製ブタ甲状腺ペルオキシダーゼ(TPO)とアジュバントとのエマルジョンを免疫し甲状腺炎を惹起した。甲状腺炎の発症の有無を組織学的に判定した。また、TG-3マウスおよび対照マウス脾細胞のin vitroにおける各種mitogenに対する幼弱化を、^3H-thymidineの細胞への取り込み量で調べた。TPOを3回免疫した対照マウス8匹中7匹で、弱〜中程度の単核球の湿潤を伴う甲状腺炎が認められたが、TG-3マウスでは8匹中1匹にのみ発症が認められた。AFPは、対照およびTG-3マウスの脾細胞のPHAによる幼若化を濃度依存的に抑制した。しかし、TG-3マウスの脾細胞のPHA応答は対照マウスに比し有意に低下していた。

1. AFP sugar lock の tissue specificity お よ び が ん sex - the の parsing C_ (57 > BL_6 マ ウ ス よ り ヒ ト AFP cDNA お よ び beta actin The promoter/enhancer を with い て cropping し た ヒ ト AFP を constant に produce す る ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス (TG - 3) の 々 の tissue を cultivation し, supernatant of の AFP の ア イ ソ フ ォ ー ム を 4 kinds の different な る レ ク チ ン を with い る レ ク チ ン ア フ ィ ニ テ ィ ー 気 swimming で solution Analyze the た. ConA, LCA, E - PHA, お よ び allo A の 4 kinds レ ク チ ン を with い た electric 気 swimming で is crucial, hepatic and splenic is crucial, crucial 脳, kidney, lung, heart, origin の AFP に そ れ ぞ れ several kinds の ア イ ソ フ ォ ー ム が confirm さ れ, organization に よ り imperceptible に sugar lock structure が violations う こ と が Ming ら か に な っ た. Lung が ん で は, AFP の sugar lock に フ コ ー ス residues が plus さ れ る こ と に よ る が ん specific な phenotype の variations change が confirm さ れ た. 2. Be 験 of thyroiditis モ デ ル を with い た AFP の immune inhibition の parsing TG - 3 マ ウ ス お よ び polices according to マ ウ ス の heel お よ び leg subcutaneous に, refined ブ タ thyroid ペ ル オ キ シ ダ ー ゼ (TPO) と ア ジ ュ バ ン ト と の エ マ ル ジ ョ ン を immune し thyroiditis を provoked し た. The に determination of whether there is を histology in the lesion of thyroiditis is に た. ま た, TG - 3 マ ウ ス お よ び polices according to マ ウ の ス spleen cells in vitro に お け る various mitogen に す seaborne る young weakening を, ^ 3 h - thymidine の cells へ の take り 込 で み quantity adjustable べ た. TPO を 3 back to immune し た polices according to マ ウ ス in seven of the eight horse horse で, weak ~ degree の 単 nuclear ball の wet を with う thyroiditis が recognize め ら れ た が, TG - 3 マ ウ ス で は 1 in 8 horse horse に の み 発 disease が recognize め ら れ た. AFP た, corresponding to およびTG-3 ウス ウス and を concentration-dependent に inhibition of <s:1> PHAによる in <s:1> splenocytes. <s:1> に た, TG-3 ウス, <s:1> spleen cell <s:1> PHA応 answer in contrast, ウスに ウスに is significantly に lower than 応 て た た た.

项目成果

Koyama, Y., et al.: "Biochemical characterization of α-fetoprotein and other serum proteins produced by a uterine endometrial" Jpn. J. Cancer Res.87. 612-617 (1996)

Koyama, Y. 等人：“子宫内膜产生的 α-胎蛋白和其他血清蛋白的生化特征”J. Cancer Res.87 (1996)。

Koyama, Y., et at.: "Lectin affinity electrophoretic demonstration of tissue specificity and malignant alteration of human" Biochim. Biophys. Res. Commun.223. 757-761 (1996)

Koyama, Y. 等人：“凝集素亲和电泳证明人类的组织特异性和恶性改变”Biochim。

Sakai, M., et al.: "Rat maf related genes : specific expression in chondrocytes, lens and spinal cord." Oncogene. 14. 745-750 (1997)

Sakai, M., et al.：“大鼠 maf 相关基因：软骨细胞、晶状体和脊髓中的特异性表达。”

Ido, A., et al.: "Cloning of the cDNA encoding the mouse ATBF1 transcription factor" Gene. 168. 227-232 (1996)

Ido, A. 等人：“编码小鼠 ATBF1 转录因子的 cDNA 的克隆”基因。

Yamamoto, R., et al.: "Alpha-fetoprotein production by a hepatoid adeno-carcinoma of the uterus." J. Clin. Pathol.49. 420-422 (1996)

Yamamoto, R. 等人：“子宫肝样腺癌产生甲胎蛋白。”