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電位依存性K^+チャンネルの機能調節分子に関する研究

电压门控K^+通道功能调节分子研究

基本信息

批准号：
08268202
负责人：
石井邦明
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Yamagata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08268202/
关键词：
電位依存性K^+チャンネルサブユニット

项目摘要

1.電位依存性K^+チャンネルのサブユニットとして報告されたラットのKvβ1.1をプローブとしてウサギ心筋のcDNAライブラリーより12個のポジティブクローンを得た。それらクローンの塩基配列は現在決定中であるが、これまでに得られている配列より、Kvβ1.1がウサギ心筋に存在することが明らかとなっている。現在まで心筋からのKvβ1.1のクローニングは報告されておらず、そのかわりヒトの心筋などからKvβ1サブファミリーのうちKvβ1.2、Kvβ1.3のクローニングが報告されているが、このことは異なる動物種におけるスプライシングの違いによるのかも知れない。またKvβ2サブファミリーに属するサブユニットも今回のスクリーニングによって得られている。これらクローンの機能は今後検討していく。2.αサブユニット(Kv1.4とKv1.5)のN末端のアミノ酸配列上良く保存されている領域よりも前の部分を欠失させ、そこにラットKvβ1.1のN末端の約30個のアミノ酸を繋げた形のキメラを作製し、Kvβ1.1のN末端のαサブユニットに対する影響を検討した。それらを卵母細胞に発現させ流れる電流を観察したところβ/Kv1.5の方は速い不活性化を示したのに対して、β/Kv1.4の方はほとんど不活性化を示さなかった。繋げた領域のアミノ酸配列の比較からβ/Kv1.4の方がβ/Kv1.5よりもアミノ酸数が6個程度少ないことがその原因として考えられたため、そのアミノ酸を加えた新しいβ/Kv1.4v2を作製し発現させたところ速い不活性化を示した。Steady-stateの不活性化曲線を比較するとβ/Kv1.4v2の方がβ/Kv1.5よりも30mV以上も負の側にあった。また野生型Kv1.4と比較すると両電流の不活性化からの回復は非常に速かったが、特にβ/Kv1.5電流の場合が速く1秒以内に完全な回復が見られた。

1. The potential dependence of K ^+, K ^+, K ^, K ^+, K ^+, K ^, K ^, K ^+, K ^, The base arrangement of the system is determined in the present case, and Kv β 1.1 is determined in the present case. Kv β 1.1 and Kv β 1.3 are reported in the report. Kv β 2 is the most important part of the game. The function of " 2. The N-terminal amino acid sequence of α-terminal (Kv1.4 and Kv1.5) was well preserved, and the N-terminal amino acid sequence of about 30 α-terminal amino acid sequences of α-terminal (Kv1.4 and Kv1.5) was controlled. The influence of α-terminal amino acid sequence of Kv1.1 on the N-terminal amino acid sequence was discussed. The current in the oocyte is detected by the reverse inactivation of β/Kv1.5 and β/Kv1.4. Comparison of acid distribution in the field: β/Kv1.4, β/Kv1.5, β/Kv1.4, β/Kv1.5, β/Kv1.4, β/Kv1.4, β/Kv1.5, β/Kv1.4, β/Kv1.4, β/ Steady-state inactivation curves are compared to β/Kv1.4v2 and β/Kv1.5 to 30 mV or more. In the case of wild type Kv1.4 and comparison, the inactivation of the current and recovery of the current are very fast, and in the case of special β/Kv1.5 current, the complete recovery of the current is observed within 1 second.