シナプスにおける新しいCa^<2+>センサーの機能と作用機構

突触中新型Ca^<2+>传感器的功能和作用机制

• 批准号: 08270241
• 负责人: 白瀧 博通
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08270241/
• 关键词: 神経伝達物質; Rab3A; Rabphilin-3A; Doc2; Ca^<2+>センサー; Rab GDI; Rob3 GAP

私共の研究室では、C2領域を2個有する蛋白質としてRabphilin3とDoc2を見い出しており、Rabphilin3とDoc2が、シナプスにおいて新たなCa^<2+>センサーとして機能していることを明らかにしつつある。本研究で、私共は、Rabphilin3が少なくとも3つの異なる領域でシナプス小胞上の蛋白分子に結合してシナプス小胞に局在していることを明らかにした。さらに、Rabphilin3がα-アクチニンに結合し、α-アクチニンによるF-アクチンの重合を促進することを明らかにした。このことから、Rabphilin3が細胞骨格系をも介して神経伝達物質の放出反応を制御している可能性が高くなった。一方、Rabphiin3は、神経伝達物質の放出反応に関与している低分子量G蛋白質Rab3Aの標的蛋白質である。そこで、Rab3A-Rabphilin3系の作用機構を明らかにするために、本研究で、私共は、Rab3AのGTPase活性を促進する活性制御蛋白質Rab3 GAPをラット大脳より精製してその一次構造を決定した。Rab3 GAPは、C末端に翻訳後脂質修飾を受けたRab3Aを含むRab3ファミリー全てに作用しが、その他のRabには作用しなかった。さらに、私共は、Rab3A-Rab GDI複合体に作用してRab3AをRab GDIから解離させる活性制御蛋白質Rab3A GDFをラットのシナプス小胞膜画分において同定し、種々のカラムクロマトグラムにて高度に精製した。Rab3A GDFは、熱処理およびトリプシン処理にて失活する蛋白分子であった。このように、本研究は予想以上に進展し、当初の目的はほぼ完成に達成することができた。

Private の total laboratory で は, C2 を 2 have す る protein と し て Rabphilin3 と Doc2 を see い out し て お り, Rabphilin3 と Doc2 が, シ ナ プ ス に お い て new た な Ca ^ 2 + > < セ ン サ ー と し て function し て い る こ と を Ming ら か に し つ つ あ る. This study were は で and private Rabphilin3 が less な く と も 3 つ の different な る field で シ ナ プ ス vesicular の に protein molecules on combining し て シ ナ プ ス vesicular に bureau in し て い る こ と を Ming ら か に し た. さ ら に, Rabphilin3 が alpha ア ク チ ニ ン に し, alpha ア ク チ ニ ン に よ る F - ア ク チ ン の overlap を promote す る こ と を Ming ら か に し た. こ の こ と か ら, Rabphilin3 が cells bone is を も interface し て god 経 の 伝 of material released against 応 を suppression し て い likely が る く な っ た. One side, Rabphiin3 伝, the neurogenic 伝 substance <e:1> releases the protein である that is related to the low-molecular-weight G protein Rab3A て る. そ こ で, Rab3A - Rabphilin3 の role institutions を Ming ら か に す る た め に, this study で, private は, Rab3A の GTPase activity を promote す る active suppression protein Rab3 GAP を ラ ッ ト big 脳 よ り refined し て そ の a tectonic を decided し た. After は, C terminal に turn 訳 Rab3 GAP lipid modification を by け た Rab3A を containing む Rab3 フ ァ ミ リ ー full て に role し が, そ の he の Rab に は role し な か っ た. さ ら に, private は, complex に Rab3A - Rab GDI し て Rab3A を Rab GDI か ら dissociation さ せ る active suppression protein Rab3A GDF を ラ ッ ト の シ ナ プ ス small cell membrane draw points に お い て with し, kind of 々 の カ ラ ム ク ロ マ ト グ ラ ム に て highly に refined し た. Rab3A GDF にて, thermal treatment およびトリプシ にて treatment にて inactivated する protein molecules であった. <s:1> ように ように, this study ように aims to make progress on the above に, achieve the original <s:1> goal ほぼ ほぼ ほぼ に and reach する とがで とがで とがで た た た た.

项目成果

Masumoto,N.: "Involvement of Rabphilin-3A in cortical granule exoctosis in mous eggs." J.Cell Biol.135. 1741-1747 (1996)

Masumoto,N.：“Rabphilin-3A 参与小鼠卵皮质颗粒的分泌。”

Fujita,Y.: "Phosphorylation of Munc-18/n-Secl/rbSecl by protein kinase C-Its implication in regulating the interaction of Munc-18/n-Secl/rbSecl with Syntaxin." J.Biol.Chem.271. 7265-7268 (1996)

Fujita,Y.：“蛋白激酶 C 磷酸化 Munc-18/n-Secl/rbSecl——其在调节 Munc-18/n-Secl/rbSecl 与突触蛋白相互作用中的意义。”

Taniguchi, T.: "Cholecystokinin-B/gastrin receptors mediate rapid formation of actin stress fibers." Oncogene. 12. 1357-1360 (1996)

Taniguchi, T.：“胆囊收缩素-B/胃泌素受体介导肌动蛋白应力纤维的快速形成。”

Senbonmatsu,T.: "Interaction of Rbphilin3 with synaptic vesicles through multiple regions" Biochem.Biophys.Res.Commun.228. 567-572 (1996)

Senbonmatsu,T.：“Rbphilin3 与突触小泡通过多个区域的相互作用”Biochem.Biophys.Res.Commun.228。

Hirao, M.: "Regulation mechanism of ERM (Ezrin/Radixin/Moesin) protein/plasma membrane association-Possible involvement of phosphatidylinositol turnover and Rho-dependent signaling pathway." J. Cell. Biol.135. 37-51 (1996)

Hirao, M.：“ERM (Ezrin/Radixin/Moesin) 蛋白/质膜关联的调节机制 - 可能涉及磷脂酰肌醇周转和 Rho 依赖性信号通路。”