記憶形成におけるRab3A系とDoc2系の機能と作用機構

Rab3A系统和Doc2系统在记忆形成中的功能和作用机制

• 批准号: 10155214
• 负责人: 白瀧 博通
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10155214/
• 关键词: 記憶; 神経伝達物質; 放出反応; Rab3A; Doc2; Rab3 GAP; dynein

私共の研究室では、低分子量G蛋白質Rab3AとC2様領域を2個有する蛋白質であるDoc2を発見し、Rab3AとDoc2が神経伝達物質の放出に関与していることを明らかにしている。さらに、Rab3Aの活性制御蛋白質としてRabGDI、Rab3GEP、Rab3GAPを、標的蛋白質としてRabphilin3を発見している。Rab3AとDoc2は、おのおののノックアウトマウスを用いた研究から、共に記憶形成に関与している可能性が高くなっている。そこで、私共は、神経伝達物質の放出におけるRab3A系とDoc2系の活性制御機構および作用機構について研究を行い、以下の成果を得た。Rab3GEPとRab3GAPは、共にラット海馬初代培養神経細胞のシナプス終末の細胞質に存在していた。このうち、Rab3GEPは、ラット褐色細胞腫細胞からのCa^<2+>依存性のgrowth hormnoneの分泌を抑制した。また、私共は、Rab3GAPのcatalytic subunitであるp130に結合する蛋白質としてp150をクローニングして一次構造を決定し、Rab3GAPがnoncatalytic subunitであるp150とcatalytic subunitであるp130の1:1のheterodimerであることを明らかにした。一方、私共は、Doc2がホルボールエステル依存性にMunc13と結合し、Ca^<2+>依存性の分泌反応を制御していることを明らかにしている。本研究で、私共は、Doc2が、微小管モーターであるダイニンのlight chainであるtctex-1に結合することを明らかにした。tctex-1結合部位を含むDoc2のN末端側フラグメントは、trans-Golgi networkから後期エンドゾームへの微小管を介した小胞輸送を抑制した。このことから、Doc2はダイニンによる小胞輸送をも介して、神経伝達物質の放出に関与している可能性が高くなった。このように、本研究は予想以上に進展し、当初の目的はほぼ完全に達成することができた。

In the private laboratory, there are two kinds of proteins in the low molecular weight G protein Rab3A and C2 domain: Doc2 and Rab3A. Doc2 are related to the release of substances in the brain. RabGDI, Rab3GEP, Rab3GAP and Rabphilin3 are the target proteins of Rab3A. Rab3A and Doc2 are highly likely to be used in research and memory formation. The following results were obtained from the research on the activity control mechanism and action mechanism of Rab3A system and Doc2 system. Rab3GEP and Rab3GAP exist in the cytoplasm of hippocampal primary cultured neurons. Rab3GEP inhibits Ca^<2+>-dependent growth hormone secretion in brown cells. Rab3GAP catalytic subunit contains p130, protein, p150, and 1:1 heterodimer. Rab3GAP catalytic subunit contains p150, protein, and 1:1 heterodimer. On one hand, private and public relations, it is clear that Doc2 can control the binding of Munc13 and the secretory reaction of Ca^<2+> dependence. In this study, we found that the light chain of micro-tubes was very complex, and the light chain of micro-tubes was very complex. tctex-1 binding site contains the N-terminal side of Doc2, and the trans-Golgi network inhibits microtubule transport. The probability of cell transport and release of neurotransmitter substances is high. This study aims to achieve the above goals.