B細胞シグナル伝達機構のチロシンホスファターゼによる制御

酪氨酸磷酸酶调节 B 细胞信号传导机制

• 批准号: 08282241
• 负责人: 矢倉 英隆
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08282241/
• 关键词: チロシンホスファターゼ; PEP; SLP-76; CD45; アポトーシス; SHIP; Lynキナーゼ; SHP-1

【目的】本研究では、B細胞抗原レセプターのシグナル伝達に関与しているチロシンホスファターゼを同定し、その機能解析をすることにより、将来的に種々の病態の修復に寄与する成果をあげることを目指している。【研究成果】(1)CD45によるLynキナーゼの制御機構:WEHI-231において、LynがCD45の選択的な基質になっていること、しかもLynのチロシンリン酸化とキナーゼ活性をネガティブに制御していることを明らかにした。その機構を解明するために、WEHI-231細胞とCD45陰性クローンを^<32>Pで標識した後、Lynをcyanogen bromideで切断し、SDS-PAGEで展開して自己リン酸化部位とネガティブ制御部位のリン酸化の程度を比較した。その結果、CD45陰性クローンでは両部位のチロシンリン酸化が抗原レセプター刺激以前に亢進していることが明らかになり、Lynの酵素活性は両部位のリン酸化のバランスにより制御されている可能性が示唆された。(2)SHP-1結合蛋白の同定:WEHI-231、BAL-17において、抗原レセプター刺激後にチロシンリン酸化される少なくとも3種類(150kD、110kD、75kD)の蛋白がSHP-1-GSTと結合すること、この結合は細胞内でも同様に認められること、結合分子中の75kDの分子がSF2領域を含む造血系の分子SLP-76であり、その結合は抗原レセプター刺激以前から認められること、さらにSHP-1に結合する150kD分子はSHIPであり、この結合も構成的であることなどを明らかにした。

[Objective] This study aims to provide guidance on the development of B-cell antigen and its related research and development, as well as on the identification and functional analysis of B-cell antigen and its related research and development. [Research results](1) Control mechanism of Lyn in CD45:WEHI-231, Lyn in CD45 and selected substrate. The structure of WEHI-231 cells was analyzed by SDS-PAGE and the degree of acidification of CD45 <32>cells was compared. The results showed that the enzyme activity of Lyn was inhibited by the enzyme activity of CD45-negative cells, and the enzyme activity of Lyn was inhibited by the enzyme activity of CD45-negative cells. (2) Identification of SHP-1 binding protein:WEHI-231 and BAL-17 are three kinds of antigens.(150kD, 110kD, 75kD) proteins bind to SHP-1-GST, and bind to 75kD molecules in the SF2 domain, including SLP-76, a hematopoietic molecule. 150kD molecules bound to SHP-1 are bound to SHIP-bound molecules.

项目成果

Nomura,T.: "Antigen receptor-mediated B cell death in blocked by signaling via CD72 on treatment with dextran sulfate and in defective in antoimmunily -prone mice." Int.Immunol.8・6. 867-875 (1996)

Nomura, T.：“在抗免疫倾向缺陷的小鼠中，通过 CD72 信号传导可阻断抗原受体介导的 B 细胞死亡。”

Mizuno,K.: "Hematopoietic cell phosphatase,SHP-1,is constitutively,associated with the SH2 domain-containing leukocyle protein,SLP-76,in B cell." J.Exg.Med.184・2. 457-463 (1996)

Mizuno, K.：“造血细胞磷酸酶 SHP-1 与 B 细胞中含有 SH2 结构域的白细胞蛋白 SLP-76 相关。”J.Exg.Med.184·2。 1996）