Ring TIRF microscope with FRAP and ablation

带 FRAP 和消融功能的环形 TIRF 显微镜

基本信息

  • 批准号:
    497257693
  • 负责人:
  • 金额:
    --
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    德国
  • 项目类别:
    Major Research Instrumentation
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    德国
  • 起止时间:
    2021-12-31 至 无数据
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

We apply for a total internal reflection fluorescence (TIRF) microscope with fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) and laser ablation. The microscope allows low-background, high-contrast imaging of near-surface events in diverse in vitro and in cellulo systems. By eliminating out-of-focus illumination, TIRF microscopy enhances the signal-to-noise ratio and allows single molecule imaging. While conventional point TIRF systems suffer from non-uniform illumination and interference patterns, the ring TIRF technology ensures even illumination by rapidly spinning the excitation light on a circle, thus averaging out any interference patterns, producing higher quality images and permitting quantitative fluorescence measurements as required by the applicants. The only available TIRF microscope at Saarbrücken campus is already used to capacity by six research groups, and it does not include the ring TIRF technology necessary for high-quality TIRF imaging. In contrast, the setup presented here will allow quantitative fluorescence measurements, thus presenting an important technical advancement over the available system. The ring TIRF setup provides unique, powerful characteristics that enable quantitative, near-surface fluorescence microscopy, even on the level of single molecules. In the past, we used ring TIRF to uncover new aspects of cytoskeletal dynamics and function: We showed that – contrary to common belief – microtubules are not only dynamic at their tips, but also along their shaft far from the tips, leading to major advances in the microtubule cytoskeleton field and demonstrating the potential of ring TIRF microscopy. In the future, we intend to employ ring TIRF microscopy to continue investigating cytoskeletal processes as well as other, near-surface events on the cellular and subcellular scale. In addition to TIRF imaging, in order to achieve a sound understanding of in vitro and subcellular processes, the applicants need to determine the mobility of molecules in vitro and in cells. The FRAP function allows flexible, controlled photobleaching in user-defined regions, thus meeting this demand. In addition, the ablation function permits moving beyond mere observational experiments through active and precise manipulation of the sample: by damaging or severing in vitro and subcellular elements such as cytoskeletal filaments, we will be able to directly probe the structural and functional aspects of these elements. The microscope we apply for will not only satisfy the increased demand for near-surface fluorescence microscopy at the Saarbrücken campus, but also enable advanced TIRF microscopy suitable for quantitative imaging, as well as provide state-of-the-art photomanipulation tools. The microscope will thus contribute to the infrastructure to promote scientific advances. It will provide a pillar for the Saarland University NanoBioMed strategy for excellence, as evidenced by the Strategy Grants awarded to two of the applicants.
我们申请了一种全内反射荧光(TIRF)显微镜,在光漂白(FRAP)和激光消融后荧光恢复。显微镜允许低背景,高对比度成像近表面事件在不同的体外和纤维素系统。通过消除失焦照明,TIRF显微镜提高了信噪比,并允许单分子成像。传统的点TIRF系统存在不均匀的照明和干扰模式,而环形TIRF技术通过在圆上快速旋转激发光来确保均匀的照明,从而平均任何干扰模式,产生更高质量的图像,并允许申请人要求的定量荧光测量。saarbr<e:1> cken校区唯一可用的TIRF显微镜已经被六个研究小组使用,而且它不包括高质量TIRF成像所必需的环形TIRF技术。相比之下,这里介绍的设置将允许定量荧光测量,从而在现有系统上呈现重要的技术进步。环形TIRF设置提供了独特的,强大的特性,使定量,近表面荧光显微镜,甚至在单分子水平。在过去,我们使用环状TIRF来揭示细胞骨架动力学和功能的新方面:我们表明-与普遍看法相反-微管不仅在其尖端动态,而且沿着远离尖端的轴也是动态的,导致微管细胞骨架领域的重大进展,并展示了环状TIRF显微镜的潜力。在未来,我们打算使用环形TIRF显微镜继续研究细胞骨架过程以及其他细胞和亚细胞尺度上的近表面事件。除了TIRF成像,为了更好地了解体外和亚细胞过程,申请人需要确定体外和细胞内分子的流动性。FRAP功能允许在用户定义的区域灵活、可控的光漂白,从而满足这一需求。此外,消融功能允许通过主动和精确的样品操作超越单纯的观察实验:通过破坏或切断体外和亚细胞元件,如细胞骨架细丝,我们将能够直接探测这些元件的结构和功能方面。我们申请的显微镜不仅可以满足saarbr<e:1> cken校区对近表面荧光显微镜日益增长的需求,还可以使先进的TIRF显微镜适用于定量成像,并提供最先进的图像操作工具。因此,显微镜将为促进科学进步的基础设施做出贡献。它将为萨尔大学的卓越纳米生物医学战略提供一个支柱,正如向两名申请人颁发的战略补助金所证明的那样。

项目成果

期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

其他文献

吉治仁志 他: "トランスジェニックマウスによるTIMP-1の線維化促進機序"最新医学. 55. 1781-1787 (2000)
Hitoshi Yoshiji 等:“转基因小鼠中 TIMP-1 的促纤维化机制”现代医学 55. 1781-1787 (2000)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
LiDAR Implementations for Autonomous Vehicle Applications
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
生命分子工学・海洋生命工学研究室
生物分子工程/海洋生物技术实验室
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
吉治仁志 他: "イラスト医学&サイエンスシリーズ血管の分子医学"羊土社(渋谷正史編). 125 (2000)
Hitoshi Yoshiji 等人:“血管医学与科学系列分子医学图解”Yodosha(涉谷正志编辑)125(2000)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Effect of manidipine hydrochloride,a calcium antagonist,on isoproterenol-induced left ventricular hypertrophy: "Yoshiyama,M.,Takeuchi,K.,Kim,S.,Hanatani,A.,Omura,T.,Toda,I.,Akioka,K.,Teragaki,M.,Iwao,H.and Yoshikawa,J." Jpn Circ J. 62(1). 47-52 (1998)
钙拮抗剂盐酸马尼地平对异丙肾上腺素引起的左心室肥厚的影响:“Yoshiyama,M.,Takeuchi,K.,Kim,S.,Hanatani,A.,Omura,T.,Toda,I.,Akioka,
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:

的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('', 18)}}的其他基金

An implantable biosensor microsystem for real-time measurement of circulating biomarkers
用于实时测量循环生物标志物的植入式生物传感器微系统
  • 批准号:
    2901954
  • 财政年份:
    2028
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Studentship
Exploiting the polysaccharide breakdown capacity of the human gut microbiome to develop environmentally sustainable dishwashing solutions
利用人类肠道微生物群的多糖分解能力来开发环境可持续的洗碗解决方案
  • 批准号:
    2896097
  • 财政年份:
    2027
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Studentship
A Robot that Swims Through Granular Materials
可以在颗粒材料中游动的机器人
  • 批准号:
    2780268
  • 财政年份:
    2027
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Studentship
Likelihood and impact of severe space weather events on the resilience of nuclear power and safeguards monitoring.
严重空间天气事件对核电和保障监督的恢复力的可能性和影响。
  • 批准号:
    2908918
  • 财政年份:
    2027
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Studentship
Proton, alpha and gamma irradiation assisted stress corrosion cracking: understanding the fuel-stainless steel interface
质子、α 和 γ 辐照辅助应力腐蚀开裂:了解燃料-不锈钢界面
  • 批准号:
    2908693
  • 财政年份:
    2027
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Studentship
Field Assisted Sintering of Nuclear Fuel Simulants
核燃料模拟物的现场辅助烧结
  • 批准号:
    2908917
  • 财政年份:
    2027
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Studentship
Assessment of new fatigue capable titanium alloys for aerospace applications
评估用于航空航天应用的新型抗疲劳钛合金
  • 批准号:
    2879438
  • 财政年份:
    2027
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Studentship
CDT year 1 so TBC in Oct 2024
CDT 第 1 年,预计 2024 年 10 月
  • 批准号:
    2879865
  • 财政年份:
    2027
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Studentship
Developing a 3D printed skin model using a Dextran - Collagen hydrogel to analyse the cellular and epigenetic effects of interleukin-17 inhibitors in
使用右旋糖酐-胶原蛋白水凝胶开发 3D 打印皮肤模型,以分析白细胞介素 17 抑制剂的细胞和表观遗传效应
  • 批准号:
    2890513
  • 财政年份:
    2027
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Studentship
Understanding the interplay between the gut microbiome, behavior and urbanisation in wild birds
了解野生鸟类肠道微生物组、行为和城市化之间的相互作用
  • 批准号:
    2876993
  • 财政年份:
    2027
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Studentship

相似国自然基金

基于单分子成像的增强型TIRF-SPR双模并行检测方法及其应用研究
  • 批准号:
    61971026
  • 批准年份:
    2019
  • 资助金额:
    59.0 万元
  • 项目类别:
    面上项目

相似海外基金

TIRF microscope for single-molecule FRET applications
适用于单分子 FRET 应用的 TIRF 显微镜
  • 批准号:
    512024179
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Major Research Instrumentation
TIRF Microscope with laser illumination and two EMCCD cameras
带激光照明和两个 EMCCD 相机的 TIRF 显微镜
  • 批准号:
    504444508
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Major Research Instrumentation
High-speed TIRF-SIM/SIM super-resolution microscope for live-cell imaging
用于活细胞成像的高速 TIRF-SIM/SIM 超分辨率显微镜
  • 批准号:
    496847469
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Major Research Instrumentation
Confocal spinning disk microscope with FRAP and TIRF
配备 FRAP 和 TIRF 的共焦转盘显微镜
  • 批准号:
    461336323
  • 财政年份:
    2021
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Major Research Instrumentation
Multifunctional Microscope for Spinning Disk, TIRF, STORM and SRRF Acquisition
用于转盘、TIRF、STORM 和 SRRF 采集的多功能显微镜
  • 批准号:
    462212046
  • 财政年份:
    2021
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Major Research Instrumentation
TIRF Super-resolution microscope
TIRF超分辨率显微镜
  • 批准号:
    450216812
  • 财政年份:
    2020
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Major Research Instrumentation
Total Internal Reflection Fluorescence Microscope (TIRF)
全内反射荧光显微镜 (TIRF)
  • 批准号:
    433522645
  • 财政年份:
    2019
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Major Research Instrumentation
ShEEP Request for Nikon TIRF STORM microscope
SheEEP 请求尼康 TIRF STORM 显微镜
  • 批准号:
    9795504
  • 财政年份:
    2019
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
Exploring the coupling between PIEZO1 subunits gating motions using TIRF
使用 TIRF 探索 PIEZO1 亚基之间的门控运动之间的耦合
  • 批准号:
    10381223
  • 财政年份:
    2019
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
MRI: Acquisition of a Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscope for Research and Education at Marquette University and the Greater Milwaukee Region
MRI:购买全内反射荧光 (TIRF) 显微镜,用于马凯特大学和大密尔沃基地区的研究和教育
  • 批准号:
    1827883
  • 财政年份:
    2018
  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
    Standard Grant
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了