Aberrant crypt fociの形成におけるGST-pの意義

GST-p 在异常隐窝病灶形成中的意义

• 批准号: 09253246
• 负责人: 高山 哲治
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09253246/
• 关键词: GST-π; 大腸癌

我々はこれまで、GST-pが大腸癌や腺腫はもとより、その前病変と考えられているACFにおいても既に発現増加していることを見出した。本研究では、GST-pの発現が大腸癌の形成過程に何らかの役割を果たしているものと想定し、GST-pのACF形成における意義を検討し、以下の結果を得た。(1)まず初めに、azoxymethane投与による発癌モデルに、GST-πの特異的阻害剤であるγ-Glutamyl-S-(benzyl)cysteinyl phenylglycineを投与したところ、投与群(14.3±3.1個/匹)では対照群(5.7±2.5/匹)に比べてACFの形成は有意に抑制された。(2)正常二倍体細胞(HEL)とGST-π発現の高いras遺伝子導入細胞(HEL/ras)を二次胆汁酸(deoxycholic acid 300mg/ml)で処理した後、TUNEL法にてアポトーシスを検討したところ、それぞれ19.5%と5.8%にapoptotic bodyを認め、GST-pi発現によりアポトーシスが抑制されることが示唆された。一方、GST-piの特異的阻害剤にて予め細胞を処理すると、apoptotic bodyはそれぞれ36.9%と9.4%に増大した。(3)HEL/ras細胞を活性酸素消去剤であるN-acetylcystein(7.5mM)で予め処理した後にDCA処理すると、生細胞数は34.0%から62.5%に増加した。つまり、GST-πによるアポトーシス抑制の機序は、その活性酸素を消去する作用によることが示された。以上の実験結果より、以下の結論が得られた。(1)大腸粘膜上皮においてGST-pの発現はACFの形成に促進的に働く。(2)GST-piは、二次胆汁酸により誘導される大腸粘膜上皮のアポトーシスを抑制する。(3)GST-πは胆汁酸により産生される活性酸素を消去することによりアポトーシスを抑制する。我々は、以上のことを再確認するためにGST-pi knock out mouseにazoxymethaneを投与し、大腸に形成されるACFを検討中であり、これらの実験結果を近々明らかにする予定である。

I 々 は こ れ ま で, GST -p が colorectal cancer や swollen glands は も と よ り, そ の before disease - と exam え ら れ て い る ACF に お い て も both に 発 now rights し て い る こ と を shows し た. This study で は, GST -p の 発 now が colorectal cancer formation の に what ら か の "を cut fruit た し て い る も の と し scenarios, GST -p の ACF formation に お け る meaning を beg し 検, the result of the following の を た. At the beginning of (1) ま ず め に, cast and に azoxymethane よ る 発 carcinoma モ デ ル に, GST - PI の specific resistance against tonic で あ る gamma Glutamyl - S - cysteinyl (benzyl) Phenylglycine を cast with し た と こ ろ, cast and group (14.3 + / - 3.1 / horse) で は polices according to group (5.7 + / - 2.5 / horse) に than べ て ACF の form は intentionally に inhibit さ れ た. (2) Normal diploid cells (HEL)とGST-π with <s:1> high <s:1> ras progenitor 伝 introduced into cells (HEL/ras)を secondary bile acid (deoxycholic acid) 300 mg/ml) で 処 Richard し た, TUNEL method after に て ア ポ ト ー シ ス を beg し 検 た と こ ろ, そ れ ぞ れ 19.5% 5.8% と に apoptotic body を confess め, GST - PI 発 now に よ り ア ポ ト ー シ ス が inhibit さ れ る こ と が in stopping さ れ た. Side, GST - PI の specific resistance against tonic に て in め cells を 処 Richard す る と, apoptotic body は そ れ ぞ れ 9.4% 36.9% と に raised large し た. (3) the HEL/ras cells を acid active element elimination tonic で あ る N - acetylcystein (7.5 mM) で to め 処 Richard し た after に DCA 処 Richard す る と, cell number は 34.0% か ら に raised 62.5% plus し た. つ ま り, GST - PI に よ る ア ポ ト ー シ ス の machine sequence は, そ を の acid active element elimination す る role に よ る こ と が shown さ れ た. The above <s:1> experimental results よ よ and the following <s:1> conclusions が result in られた. (1) The colonic mucosal epithelium shows にお にお てGST-p <s:1>, and the formation of ACF <e:1> is に promoting に く. (2)GST-pi and secondary bile acid によ される induce される colonic mucosal epithelium <s:1> アポト シスを inhibition する. (3)GST-π <s:1> bile acid によ によ produces される active acid を eliminates する <s:1> とによ <s:1> アポト シスを シスを シスを inhibits する. I 々 は, above の こ と を reconfirm す る た め に GST - PI if out mouse に azoxymethane を cast with し, e. に さ れ る ACF を 検 beg in で あ り, こ れ ら の be 験 results を nearly 々 Ming ら か に す る designated で あ る.

项目成果

Ban N,Takayama T,Niitsu Y,et al: "Transfection of glutathione S-transferase(GST)-π antisense complementary DNA increases the sensitivity of a colon cancer cell line to adriamycin,cisplatin,melphalan,and etoposide." Cancer Research. 56. 3577-358 (1996)

Ban N、Takayama T、Niitsu Y 等人：“谷胱甘肽 S-转移酶 (GST)-π 反义互补 DNA 的转染增加了结肠癌细胞系对阿霉素、顺铂、美法仑和依托泊苷的敏感性。” 56. 3577-358 (1996)

Niitsu Y,Takayama T,et al.: "A Proof of glutathione S-transferase-pi-related multidrug resistance by transfer of antisense gene to cancer cells and sense gene to bone marrow stem cel" Chemico-Biological Interactions. (in press).

Niitsu Y、Takayama T 等人：“通过将反义基因转移到癌细胞和将正义基因转移到骨髓干细胞来证明谷胱甘肽 S-转移酶-pi 相关的多药耐药性”化学-生物相互作用。

Kuga T,Niitsu Y,et al: ":Fibronectin fragment mediated retroviral transfer of glutathione S-transferase pi gene into CD34+ cells to protect them against alkylating agen" Human Gene Therapy. 8. 1901-1910 (1997)

Kuga T、Niitsu Y 等人：“纤连蛋白片段介导的谷胱甘肽 S-转移酶 pi 基因逆转录病毒转移到 CD34 细胞中，以保护它们免受烷化剂的侵害”人类基因疗法。