Aberrant crypt fociの形成におけるGST-pの意義

GST-p 在异常隐窝病灶形成中的意义

• 批准号: 09253246
• 负责人: 高山 哲治
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09253246/
• 关键词: GST-π; 大腸癌

我々はこれまで、GST-pが大腸癌や腺腫はもとより、その前病変と考えられているACFにおいても既に発現増加していることを見出した。本研究では、GST-pの発現が大腸癌の形成過程に何らかの役割を果たしているものと想定し、GST-pのACF形成における意義を検討し、以下の結果を得た。(1)まず初めに、azoxymethane投与による発癌モデルに、GST-πの特異的阻害剤であるγ-Glutamyl-S-(benzyl)cysteinyl phenylglycineを投与したところ、投与群(14.3±3.1個/匹)では対照群(5.7±2.5/匹)に比べてACFの形成は有意に抑制された。(2)正常二倍体細胞(HEL)とGST-π発現の高いras遺伝子導入細胞(HEL/ras)を二次胆汁酸(deoxycholic acid 300mg/ml)で処理した後、TUNEL法にてアポトーシスを検討したところ、それぞれ19.5%と5.8%にapoptotic bodyを認め、GST-pi発現によりアポトーシスが抑制されることが示唆された。一方、GST-piの特異的阻害剤にて予め細胞を処理すると、apoptotic bodyはそれぞれ36.9%と9.4%に増大した。(3)HEL/ras細胞を活性酸素消去剤であるN-acetylcystein(7.5mM)で予め処理した後にDCA処理すると、生細胞数は34.0%から62.5%に増加した。つまり、GST-πによるアポトーシス抑制の機序は、その活性酸素を消去する作用によることが示された。以上の実験結果より、以下の結論が得られた。(1)大腸粘膜上皮においてGST-pの発現はACFの形成に促進的に働く。(2)GST-piは、二次胆汁酸により誘導される大腸粘膜上皮のアポトーシスを抑制する。(3)GST-πは胆汁酸により産生される活性酸素を消去することによりアポトーシスを抑制する。我々は、以上のことを再確認するためにGST-pi knock out mouseにazoxymethaneを投与し、大腸に形成されるACFを検討中であり、これらの実験結果を近々明らかにする予定である。

我们以前已经发现，GST-P不仅在结肠癌和腺瘤中的表达增加，而且在ACF中也在增加，而ACF也被认为是一种质量。在这项研究中，我们假设GST-P表达在结肠癌的形成中起着一定作用，并检查了GST-P在ACF形成中的重要性，并获得了以下结果。 （1）首先，当γ-谷氨酰基-S-（苄基）伴半氨基甘氨酸是GST-π的特异性抑制剂，由甲氧基烷施用引起的致癌模型施用时，ACF形成在管理组中得到了显着抑制的ACF形成（14.3±3.1 cells/Marine/Maroone组）（2.5）2.5±2.7±2.7±2.7±。 （2）在用高GST-π表达的正常二倍体细胞（HEL）和RAS转基因细胞（HEL/RAS）用二级胆汁酸（脱氧胆酸300 mg/ml）处理后，在19.5％和5.8％的GST抑制中，使用TUNEL方法研究了凋亡。另一方面，当细胞用特定的GST-PI抑制剂预先处理时，凋亡体分别增加到36.9％和9.4％。 （3）当用N-乙酰基囊菌（7.5 mm），活性氧气清除剂和DCA处理预处理HEL/RAS细胞时，活细胞的数量从34.0％增加到62.5％。换句话说，已经表明，GST-π抑制凋亡的机制是由于其擦除活性氧的作用。上述实验结果提供了以下结论。 （1）GST-P的表达促进了结肠粘膜上皮中ACF的形成。 （2）GST-PI抑制次生胆汁酸诱导的结肠粘膜上皮的凋亡。 （3）GST-π通过消除由胆汁酸产生的活性氧抑制凋亡。为了证实这一点，我们已经对GST-PI敲除小鼠进行了甲氧基甲烷，目前正在研究大肠中形成的ACF，我们计划很快阐明这些实验的结果。

项目成果

Ban N,Takayama T,Niitsu Y,et al: "Transfection of glutathione S-transferase(GST)-π antisense complementary DNA increases the sensitivity of a colon cancer cell line to adriamycin,cisplatin,melphalan,and etoposide." Cancer Research. 56. 3577-358 (1996)

Ban N、Takayama T、Niitsu Y 等人：“谷胱甘肽 S-转移酶 (GST)-π 反义互补 DNA 的转染增加了结肠癌细胞系对阿霉素、顺铂、美法仑和依托泊苷的敏感性。” 56. 3577-358 (1996)

Niitsu Y,Takayama T,et al.: "A Proof of glutathione S-transferase-pi-related multidrug resistance by transfer of antisense gene to cancer cells and sense gene to bone marrow stem cel" Chemico-Biological Interactions. (in press).

Niitsu Y、Takayama T 等人：“通过将反义基因转移到癌细胞和将正义基因转移到骨髓干细胞来证明谷胱甘肽 S-转移酶-pi 相关的多药耐药性”化学-生物相互作用。

Kuga T,Niitsu Y,et al: ":Fibronectin fragment mediated retroviral transfer of glutathione S-transferase pi gene into CD34+ cells to protect them against alkylating agen" Human Gene Therapy. 8. 1901-1910 (1997)

Kuga T、Niitsu Y 等人：“纤连蛋白片段介导的谷胱甘肽 S-转移酶 pi 基因逆转录病毒转移到 CD34 细胞中，以保护它们免受烷化剂的侵害”人类基因疗法。