ACFはにrasによるGST-π遺伝子誘導を介して自らのアポトーシスを回避する-GST-pノックアウトマウスを用いた実証-

ACF 通过 ras 诱导 GST-π 基因避免自身凋亡 - 使用 GST-p 敲除小鼠进行演示 -

基本信息

批准号：
12215123
负责人：
高山哲治
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215123/
关键词：
GST-π アポトーシス ACF

项目摘要

我々はこれまで、大腸癌発癌過程の初期病変であるACFではras変異が既に陽性であり、このrasによりJun/Fosを介してGlutathione S-transeferase(GST)-π発現が誘導されることを明らかにした。本研究では、まずGST-πが二次胆汁酸によるアポトーシスを抑制するかどうかを検討するとともに、GST-πによるアポトーシス抑制の機序を解析する。まず初めに正常二倍体細胞(HEL)にGST-π遺伝子を導入し、GST-πが二次胆汁酸により誘導されるアポトーシスを抑制するかどうかを検討したところ、有意に抑制することが示された。また、GST-πをoverexpressionしている大腸の微小病変であるaberrant crypt foci(ACF)は、二次胆汁酸によるアポトーシスに抵抗性を示すことが明らかにされた。本研究では次に、GST-πと二次胆汁酸(deoxycholic acid,DCAなど)の相互作用を検討するために、まずDCAのGST-π活性に対する効果を検討したところ、dose-dependentに抑制することが示されれ。さらに、Circular Dichloism(CD)解析によりGST-πが直接DCAと結合することが示された。さらに、大腸発癌過程におけるGST-πの意義を検討するため、GST-πノックアウトマウス(KOマウス)に大腸発癌剤であるazoxymethaneを投与したところ、KOマウスでは対照群に比べてACF数及びポリープ数ともに有意に減少していた。つまり、ACFに発現するGST-πは二次胆汁酸により誘導されるアポトーシスを抑制することにより発癌に促進的に作用することが明らかにされた。

我们先前已经表明，ACF是结肠癌阶段的早期病变，已经具有阳性的RAS突变，并且RAS通过JUN/FOS诱导谷胱甘肽S-疏松酶（GST）-π表达。在这项研究中，我们将首先检查GST-π是否抑制了由继发性胆汁酸引起的凋亡，并分析了由GST-π引起的抑制凋亡的机制。首先，我们将GST-π基因引入了正常二倍体细胞（HEL），以检查GST-π是否抑制了次生胆汁酸诱导的凋亡，并被证明会显着抑制它。还发现，GST-π的大肠过表达中的一个异常隐窝灶（ACF）对由继发性胆汁酸引起的细胞凋亡具有抗性。接下来，在这项研究中，为了研究GST-π与二级胆汁酸（脱氧胆酸，DCA等）之间的相互作用，我们首先检查了DCA对GST-π活性的影响，并表明它被抑制至剂量依赖性方式。此外，圆形二分法（CD）分析表明，GST-π直接与DCA结合。此外，为了研究在结肠癌发生过程中GST-π的重要性，当GST-π基因敲除小鼠（KO小鼠）被对GST-π敲除小鼠（KO小鼠）施用时，与对照组相比，KO小鼠的ACF和息肉的数量显着减少。换句话说，已经揭示出在ACF中表达的GST-π通过抑制次生胆汁酸诱导的凋亡来促进癌变。