TGF-βスーパーファミリー受容体を介するシグナル伝達機構の解析

TGF-β超家族受体介导的信号转导机制分析

• 批准号: 09254201
• 负责人: 澁谷 浩司
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09254201/
• 关键词: BMP; Yeast two hybrid system; BRAM2; Differential display; Dlx-5; 骨分化

BMP受容体会合分子BRAM2を培養細胞系に導入し、BMPやTGF-β受容体との会合特異性を検討したところ、BMPR-IA特異的に会合する分子であると考えられた。BRAM2はTAK1活性化因子TAB1とも結合しうることも明らかとなり、その結合領域はやはりBRAM2のC末側約100アミノ酸の領域であった。これらのことから、BRAM2はBMP受容体とTAK1を介したシグナル伝達系とを結ぶアンカー的役割を果たしているBMPシグナル分子であると考えられた。BMP受容体会合分子BRAM2がTAB1とも会合し、アンカー的な役割を果たしていることが予想されたが、その機能的な役割は明らかとなっていない。今後は果たしてBRAM2がシグナルをポジティブにもしくはネガティブに伝えているのかを検討していく必要がある。Differential display法を用いることにより、BMP刺激により誘導される遺伝子を探索し、マウスDlx-5を得た。マウスDlx-5mRNAは骨組織特異的に発現されており、他の組織では脳でわずかに見られるだけであった。またBMP刺激により速やかに発現誘導され、その転写誘導には新たなタンパク合成を必要としないことも明らかとなった。さらに骨折モデルマウスを用い、骨折部位の組織における骨再生過程でDlx-5が発現誘導されていることも明らかとした。Dlx-5発現細胞を骨芽細胞株MC3T3-E1で樹立した。得られた発現細胞のうちDlx-5高発現細胞株はBMP刺激することなく、骨分化マーカーの発現を誘導し、明らかな骨分化誘導が確認された。またこのとき骨分化に必要な転写因子であるCbfa-1の発現誘導は起こっていないことからDlx-5が骨分化誘導に必須な役割を果たしている新たな転写因子であることを明らかとした。BMPシグナルに呼応する標的遺伝子をDifferential display法を用いることにより、単離、同定し、Dlx-5が骨分化誘導能を有することを示した。このDlx-5がBMPの初期応答遺伝子であると考えられることから、シグナル分子TAK1やSmadの下流遺伝子である可能性も考えられ、この点を明らかにすることは興味あるところである。

BMP receptor confluent molecules BRAM2 are introduced into cultured cell lines, and BMP-IA specific confluent molecules are discussed. BRAM2 is activated by TAB1, and the binding domain is about 100 degrees on the end of BRAM2. BRAM2 is a BMP receptor and TAK1 is a BMP receptor and TAK 1 is a BMP receptor. BMP receptor rendezvous molecule BRAM2 TAB1 Now, BRAM2 is the only way to get started. Differential display method is used to explore the effects of BMP stimulation on gene expression. Dlx-5mRNA is expressed in tissue-specific manner, and in other tissues. BMP stimulation is necessary for the development and synthesis of new genes. The bone regeneration process in the fracture site was induced by Dlx-5. Dlx-5 developing cells and bone bud cell line MC3T3-E1 were established. Dlx-5 high expression cell line was confirmed by BMP stimulation and induction of bone differentiation. Cbfa-1 is the essential factor for bone differentiation. Dlx-5 is the essential factor for bone differentiation. BMP is a target gene for Differential display. It can be used in different ways. It can be used in different ways. Dlx-5 is the initial phase of BMP. It is possible to examine the molecular structure of TAK1 and Smad.

项目成果

Kurozumi, et al.: "BRAM1,a BMP receptor-associated molecule involved in BMP signalling." Genes to Cells. (in press). (1998)

Kurozumi 等人：“BRAM1，一种参与 BMP 信号传导的 BMP 受体相关分子。”

Shirakabe, et al.: "TAK1 mediates the ceramide signaling to Stress-activated protein kinase/c-Jun N-terminal kinase." J.Biol.Chem.272. 8141-8144 (1997)

Shirakabe 等人：“TAK1 介导神经酰胺信号传导至应激激活蛋白激酶/c-Jun N 末端激酶。”

Shibuya, et al.: "Role of TAK1 and TAB1 in BMP signaling in early Xenopus development." EMBOJ.17. 1019-1028 (1998)

Shibuya 等人：“TAK1 和 TAB1 在爪蟾早期发育中 BMP 信号传导中的作用。”